胆固醇氧化酶发酵制备工艺

摘要

本发明属于生物工程技术领域。将球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)C—412，经过培养、发酵得到有酶活的菌体，通过分离、提取、精制制备胆固醇氧化酶。该酶的稳定性好，可以保存一年半时间。该酶试剂可供临床化验，用于检测血清中胆固醇，检测准确率高，数据稳定。

主权项

1、一种利用发酵工程制备胆固醇氧化酶的工艺，本发明的特征在于将球孢链霉菌(Streptomyces globisporus)C-412的菌种，经配方为4%葡萄糖、2%黄豆饼粉水解液、0.5%酵母膏、0.5%可溶性淀粉、0.2%碳酸钙的种子培养基100毫升置三角瓶中，于旋转摇床220转/分，28℃培养48-72小时，再经配方为3%黄豆饼粉水解液、1%葡萄糖、0.5%酵母膏、2.0%甘油、0.1%K2HPO4、0.1%碳酸钙的发酵培养基、28℃24-36小时，分离菌丝体或经配方为1-4%葡萄糖、0.1-1%可溶性淀粉、1-5%豆饼粉水解液、0.5%-2%酵母粉，L-10 0.1-10%诱导剂PH6-9的种子培养基在温度25～35℃通气搅拌培养48-72小时，再经组份为1-4%葡萄糖、1-5%豆饼粉水解液、0.1-1%K2HPO4、0.1-0.5%蛋白胨、0.1-0.8%诱导剂L-10PH6-9的发酵培养基在温度25-35℃发酵培养18-30小时分离菌丝体、再经提取、盐析、透析、柱层析精制获得胆固醇氧化酶。