APPAREIL ET PROCEDE POUR LE DOSAGE DES POLYNUCLEOTIDES

摘要

UTILISATION DE LA REFLEXION INTERNE TOTALE D'UN RAYONNEMENT D'EXCITATION SUR UN REVETEMENT 32 LIE A LA SURFACE D'UNE CELLULE DE VERRE 22 OPTIQUEMENT CONDUCTRICE. LE REVETEMENT COMPREND AU DEPART DES POLYNUCLEOTIDES A SIMPLE BRIN COUPLES A DES SITES DE FIXATION INDIVIDUELS SUR LADITE SURFACE, CES POLYNUCLEOTIDES ETANT AU MOINS EN PARTIE COMPLEMENTAIRES DE LA FORME A SIMPLE BRIN DU POLYNUCLEOTIDE A DOSER. CHAQUE MOLECULE DU POLYNUCLEOTIDE COUPLE EST RELIEE A LADITE SURFACE PAR UN ESPACEUR RELIE A UNE SEQUENCE POLYA-POLYT CONJUGUEE IRREVERSIBLEMENT A UNE EXTREMITE DU POLYNUCLEOTIDE COUPLE. LORSQUE LA SURFACE REVETUE VIENT EN CONTACT AVEC UN ECHANTILLON CONTENANT LE POLYNUCLEOTIDE A SIMPLE BRIN COMPLEMENTAIRE DU POLYNUCLEOTIDE LIE, LA RENATURATION A LIEU, CONDUISANT A LA FORME A DOUBLE BRIN DU POLYNUCLEOTIDE INTERESSANT. UN COLORANT FLUOROCHROME SPECIFIQUE DE CETTE FORME EST COUPLE A CETTE DERNIERE; LE COLORANT COMPREND UN CHROMOPHORE EXCITABLE PAR LE RAYONNEMENT D'EXCITATION POUR EMETTRE UN RAYONNEMENT FLUORESCENT, QUI EST ENSUITE CAPTE ET MESURE.