PROCESS FOR THE PREPARATION OF A BACTERIAL CLONE PRODUCING HUMAN .ALPHA .-1-ANTITRYPSINE

摘要

La présente demande a pour objet un procédé de préparation d'un clone bactérien produisant l'.alpha. 1-antitrypsine humaine. Ce procédé est caractérisé en ce qu'on extrait et purifie les ARN messagers totaux de foie humain, on enrichit ces messagers en molécules codant pour l'.alpha. 1-antitrypsine humaine, on effectue la synthèse in vitro de l'A D N complémentaire double brin au départ de cette fraction messagère enrichie, on enrichit la préparation d'A D N complémentaire double brin en molécules de taille correspondant à celle de l'A D N - AT, on ajoute des extrémités cohésives à cette préparation d'A D N complémentaire double brin enrichie en A D N -A T, on mélange in vitro cette fraction enrichie portant des extrémités cohésives avec un vecteur plasmide portant des extrémités cohésives complémentaires pour obtenir des molécules hybrides, on transforme des bactéries hôtes Eschérichia Coli par ces molécules hybrides, on sélectionne parmi ces bactéries transformées celles qui ont inséré un fragment d'A D N humain de manière à obtenir une banque de clones, on isole de cette banque les clones porteurs de l'A D N -A T par crible caractéristique de l'.alpha. 1-antitrypsine humaine, on identifie parmi ces clones ceux qui expriment l'.alpha. 1-antitrypsine humaine.