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PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR EL PLASMIDO PCR714. CONSISTE EN CORTAR, MEDIANTE ENZIMAS DE RESTRICCION, LA SECUENCIA BASE DE PCR701 ENTRE LA SECUENCIA SD Y EL CODON ATG; LIGAR LOS EXTREMOS CORTADOS; Y CON ESTO ALTERAR LA CONSTITUCION DE LOS PARES DE BASES ENTRE DICHAS SECUENCIAS SD Y ATG, TAL COMO LA ADAPTACION DE PARES BASE Y/O EL NUMERO DE PARES BASE QUE INTERVIENEN, SIENDO POSIBLE ALARGAR EL ESPACIAMIENTO ENTRE LA SECUENCIA SD Y EL CODON DE INICIACION ATG ESCINDIENDO CON ENZIMAS DE RESTRICCION, REPARANDO LOS TERMINOS DE UNA SOLA HEBRA RESULTANTES, Y LIGANDO LOS EXTREMOS CORTADOS; SIENDO POSIBLE A LA INVERSA ACORTAR DICHO ESPACIAMIENTO SEPARANDO LOS TERMINOS DE UNA SOLA HEBRA Y LIGANDO LOS EXTREMOS CORTADOS; UTILIZANDO PREFERIBLEMENTE EL ULTIMO METODO. TIENE UTILIDAD PARA PROPORCIONAR ALTOS NIVELES DE EXPRESION DE PROQUIMOSINA.
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