THERMALLY INDUCED PHASE SEPARATION IMMUNOASSAY.

摘要

Analyse immunologique dans laquelle une séparation de phase induite thermiquement est utilisée pour la séparation entre des réactifs liés spécifiquement et des réactifs libres. Un premier réactif est conjugué avec un polymère thermo-sensible pour former un conjugué polymère/réactif et un deuxième réactif est conjugué avec un rapporteur pour former un conjugué rapporteur/réactif. Le polymère/réactif, le rapporteur/réactif et des échantillons de fluide biologique qu'on soupçonne contenir l'analyte sont mélangés de manière à former une solution à une température autre que celle à laquelle le polymère précipite. On laisse s'établir des liaisons spécifiques, de manière à former un complexe ternaire. La teneur en sel de la solution ajustée est alors ajustée pour obtenir une concentration suffisante pour provoquer la précipitation du complexe de la solution, on mesure la quantité d'activité du rapporteur dans le complexe précipité ou dans la solution et l'on détermine à partir de cette mesure la présence et/la concentration de l'analyte. Alternativement, le premier réactif peut être conjugué avec un monomère et copolymérisé successivement avec des monomères supplémentaires pour produire un copolymère thermo-sensible. Dans une autre variante, un copolymère activé thermo-réversible caractérisé par une plus faible température critique de solution est produit par copolymérisation d'un monomère, ce qui produit un polymère possédant une plus faible température critique de solution et un deuxième monomère. Le deuxième monomère est soit un monomère à substitution vinyle pouvant se lier à un partenaire de liaison spécifique, soit un monomère devant être activé après la polymérisation pour produire une fonctionnalité susceptible de se lier à un partenaire de liaison spécifique. Il est également possible de procéder à de multiples analyses sur un seul échantillon en choisissant une variété de polymères, chaque polymère possèdant un partenaire de liaison spécifique différent conjugué au polymère et une différente température