NUCLEIC ACID SEQUENCES ATTACHED TO MATERIALS SENSITIVE TO MAGNETIC FIELDS, AND METHODS OF ASSAY AND APPARATUS USING SUCH ATTACHED SEQUENCES.

摘要

Particules magnétiques revêtues de dérivés de cellulose, par exemple la nitrocellulose, s'unissant de manière à former un support pour les séquences d'ADN ou d'ARN. Une séquence sonde, elle même marquée, par exemple avec de la biotine, s'hybride avec des séquences supportées complémentaires appropriées, et les complexes résultant sont séparés magnétiquement. L'avidine, ou la streptavidine, s'accouple ensuite avec la biotine et le complexe est de nouveau séparé magnétiquement. L'avidine peut être déjà liée avec un enzyme marqueur tel que le péroxyde de raifort, ou la glucose oxydase, ou la phosphatase alcaline, ou peut être par la suite liée à ces substances. Dans les deux cas, un contact ultérieur avec un substrat approprié à l'enzyme (H2O2, glucose, phosphate de phényle) produit une réaction permettant une mesure électrochimique soit via un composé médiateur de ferrocène (H2O2, glucose soit par oxydation sur la surface d'une électrode (phénol à partir de phosphate de phényle). Cette réaction est influencée de manière très sensible par la présence d'une hybridation initiale ou par la quantité de cette hybridation; des quantités d'attomole sont mesurables.