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Es werden ein Verfahren zur Bestimmung von Gesamt-Bilirubin in einer biologischen Probe nach der Diazomethode sowie hierfür geeignete Reagenzien beschrieben. Diese Methode besteht darin, dass man bei der Billirubin-Bestimmung ein oder mehrere Detergenzien der allgemeinen Formel <IMAGE> worin R1, R2, n, R3 und R4 die in Anspruch 1 erwähnte Bedeutung haben, verwendet. Die Methode gemäss vorliegender Erfindung zur Bestimmung von Bilirubin gewährt eine höhere Linearität, eine günstigere Kinetik der Reaktion, die die Anwendung des Autoblanking-Systems erlaubt, eine einfachere Reagenzienzubereitung, eine lange Gebrauchslösungsstabilität und eine gute Reproduzierbarkeit. Ein ganz besonders bevorzugtes Detergenz der allgemeinen Formel I ist Dodecyläthyldimethylammoniumbromid. Die Reagenzien zur Bestimmung von Bilirubin gemäss vorliegender Erfindung können in wässriger Lösung oder bevorzugt in stabilisierter und lyophilisierter Form vorliegen.
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