UN PROCEDIMIENTO PARA LA PRODUCCION DE UN ACIDO NUCLEICO O UN OLIGONUCLEOTIDO.

摘要

PREPARACION DE UNA SONDA QUE CONTIENE UN ACIDO NUCLEICO INMOVILIZADO. SE OBTIENE ACOPLANDO ENZIMATICAMENTE UN NUCLEOTIDO A UN EXTREMO PREDETERMINADO DEL ACIDO NUCLEICO Y ACOPLANDO DESPUES UN SOPORTE SOLIDO, COMO CELULOSA, A TRAVES DEL NUCLEOTIDO. DE ESTA FORMA LA RIBOSA DEL NUCLEOTIDO SE PUEDE OXIDAR CON PERYODATO SODICO, FORMANDO GRUPOS ALDEHIDO, QUE REACCIONAN CON UN GRUPO AMINO PRIMARIO INTRODUCIDO EN LA CELULOSA, FORMANDO UNA BASE DE SCHIFF; ESTA BASE SE REDUCE A GRUPO AMINO SECUNDARIO SATURADO POR REACCION CON BOROHIDRURO. EL ACOPLAMIENTO NO INTERFIERE CON LA CAPACIDAD DE HIBRIDACION DEL ACIDO NUCLEICO E IMPLICA PREFERIBLEMENTE UN SOLO ENLACE COVALENTE POR ACIDO NUCLEICO CON EL SOPORTE SOLIDO. ESTE SOPORTE PUEDE SER NYLON, POLIMEROS ACRILICOS, SOPHADEX, SEPHAROSE Y SIMILARES, Y PREFERENTEMENTE CELULOSA Y SUS ESTERES. LA SONDA ES ADECUADA PARA ANALISIS PRECISOS DE GENES DE HIBRIDACION.