INHIBIN AND METHOD OF PURIFYING SAME

摘要

Deux protéines de 32,000-daltons présentant une activité d'inhibine ont été isolés à partir du fluide folliculaire porcin par chromatographie à affinité héparine-sépharose, suivie par filtration sur gel sur du Séphacryl S-200 et après quatre étapes de chromatographie à l'état liquide de haut rendement à phase inversée. Chaque molécule isolée se compose de deux chaînes possédant des points moléculaires d'environ 18000 et 14000 daltons, respectivement, liées entre elles par un lien bisulfure. Le microséquencement a révélé que la partie terminale NH2 de la chaine 18K des deux protéines est égale à Ser-Thr-Ala-Pro-Leu-Pro-Trp-Pro-Trp-Ser-Pro-Ala-Ala-Leu-Arg-Leu-Leu-Gln-Arg-Pro-Pro-Glu-Glu-Pro-Ala-Val, que la partie terminale de l'une des chaînes 14K est égale à Gly-Leu-Glu-Cys-Asp-Gly-Arg-Thr-Asn-Leu-Cys-Cys-Arg-Gln-Gln-Phe-Phe-Ile-Asp-Phe-Arg-Leu-Ile-Gly-Trp, et que la partie terminale de l'autre chaine 14K est égale à Gly-Leu-Glu-Cys-Asp-Gly-Lys-Val-Asn-Ile-Cys-Cys-Lys-Lys-Gln-Phe-Phe-Val-Ser-Phe-Lys-Asp-Ile-Gly-Trp-Asn-Asp-Trp-Ile-Ile-Ala-Pro. Les deux protéines ont maintenant été caractérisées, chacune comprenant une première chaine longue de 134 résidus liés par un lien bisulfure à une deuxième chaine longue de 116 ou 115 résidus. On pense que la première chaîne est glycosylée, ce qui explique la différence entre le nombre de résidus et le poids moléculaire apparent de 18K. Ces protéines 32K inhibent spécifiquement la sécrétion basale de FSH, mais non pas celle de LH, dans une souris avant le système de culture monocouche pituitaire. La dose efficace demi-maximale est égale à 450 pg/ml pour l'une et 900 pg/ml pour l'autre.