METHOD OF PRODUCING AND SELECTIVELY ISOLATING PROTEINS AND POLYPEPTIDES, RECOMBINANT AND EXPRESSION VECTOR THEREFOR AND FUSION PROTEIN ABLE TO BIND TO THE CONSTANT REGION OF IMMUNOGLOBULINS

摘要

Procédé de production et d'isolation sélective d'une protéine ou d'un polypeptide désirés ou d'un de leurs dérivés, consistant à construire un vecteur recombinant comprenant une séquence d'ADN assurant le codage de la protéine ou du polypeptide désiré lié fonctionnellement à une séquence d'ADN assurant le codage de la protéine A ou d'un fragment de polypeptide actif de celle-ci ou toute autre macromolécule pouvant se fixer sur les régions constantes des immunoglobulines, de telle sorte que les séquences d'ADN donnent ensemble le codage d'un produit de fusion et de fixation d'IgG entre la protéine ou le polypeptide désiré et la protéine A, le fragment de polypeptide actif de celle-ci ou la macromolécule; à transformer un hôte compatible avec le vecteur recombinant de sorte que les séquences d'ADN combinées donnant le codage du polypeptide ou de la protéine de fusion peuvent être exprimées par l'hôte, et à former une culture de l'hôte transformé dans un milieu de croissance approprié pour produire le polypeptide ou la protéine de fusion; à isoler de manière sélective le polypeptide ou la protéine de fusion par adsorption sur un matériau de support porteur d'IgG; et à désorber éventuellement le polypeptide ou la protéine de fusion du support porteur d'IgG, ce polypeptide ou cette protéine de fusion codé par la séquence d'ADN combinée comprenant éventuellement un site de clivage unique entre la partie A de la protéine et la partie de protéine ou de polypeptide désiré, cette partie de protéine ou de polypeptide désiré étant ensuite séparée par clivage du reste du polypeptide ou de la protéine de fusion soit pendant qu'ils sont adsorbés sur le support porteur d'IgG soit après leur désorption du support. Sont également décrits un vecteur hybride utilisé dans ce procédé, un procédé et un vecteur d'expression pour sa préparation ainsi qu'un organisme hôte transformé par le vecteur hybride.