PROCEDIMIENTO PARA PRODUCIR PEPTIDOS.

摘要

UN PROCESO PARA LA PRODUCCION DE UN PEPTIDO (PEPTIDO OBJETO) QUE COMPRENDE: A) EL CULTIVO DE CELULAS HUESPED TRANSFORMADAS CON UN PLASMIDO CAPAZ DE EXPRESAR UN GEN QUE CODIFICA PARA UNA PROTEINA DE FUSION REPRESENTADA EN LA SIGUIENTE FORMULA: A-L-B EN DONDE, B ES UN PEPTIDO OBJETO, A ES UN PEPTIDO PROTECTOR FORMADO POR DE 90 A 200 RESIDUOS DE AMINOACIDOS Y L ES UN PEPTIDO DE ENLACE SITUADO ENTRE EL C TERMINAL DE DICHO PEPTIDO PROTECTOR Y EL N TERMINAL DE DICHO PEPTIDO OBJETO Y SELECCIONADO DE TAL FORMA QUE SE TRATE LA PROTEINA DE FUSION CON UN ENZIMA O UNA SUBSTANCIA QUIMICA, SE SEPARA EL PEPTIDO OBJETO MENCIONADO ANTERIORMENTE Y SE SELECCIONAN DICHOS PEPTIDOS PROTECTOR Y DE ENLACE PARA QUE EL PUNTO ISOELECTRICO DE LA PROTEINA DE FUSION COMPLETA A-L-B ESTE COMPRENDIDA EN LA GAMA DE 4,9-6,9; B) LA OBTENCION DE UNA FRACCION INSOLUBLE QUE COMPRENDE CUERPOS DE INCLUSION MEDIANTE LA HOMOGENEIZACION DE LAS CELULAS CULTIVADAS DE DICHO CUERPO TRANSFORMANTE; C) LA SOLUBILIZACION DE UNA PROTEINA DE FUSION EN DICHOS CUERPOS DE INCLUSION MEDIANTE EL TRATAMIENTO DE DICHA FRACCION INSOLUBLE CON EL AGENTE SOLUBILIZANTE; Y D) LA DISOCIACION DEL ENLACE PEPTIDO ENTRE EL C TERMINAL DEL RESIDUO DEL AMINOACIDO DE ENLACE Y EL N TERMINAL DEL PEPTIDO OBJETO DE DICHA PROTEINA DE FUSION SOLUBILIZADA PARA LIBERAR DICHO PEPTIDO OBJETO DEL RESTO DE LOS PEPTIDOS, SEGUIDA POR LA PURIFICACION DE DICHO PEPTIDO OBJETO. LA PRESENTE INVENCION PUEDE EXPRESAR UN PEPTIDO OBJETO EN UNA CANTIDAD GRANDE Y ACUMULAR DICHO PEPTIDO OBJETO EN LAS CELULAS HUESPED EN FORMA DE CUERPOS DE INCLUSION.