重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的制备方法及其表达载体和工程菌

摘要

本发明提供了一种重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的制备方法及其表达载体和工程菌。本发明主要是将克隆修饰的rhGM-CSF基因构建分泌型表达质粒pKpL-GM-CSF，并转化酵母菌株GS115，构建成分泌型表达rhGM-CSF的酵母重组工程菌株，然后发酵培养，并经分离纯化得到rhGM-CSF。本发明中是采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体型表达系统，目标蛋白rhGM-CSF不需要复性，可大幅提高其生物比活性，减少副作用，降低生产成本。

主权项

1、一种表达重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子rhGM-CSF的分泌型表达载体，该载体包含：rhGM-CSF序列、MS2聚合酶的SD序列，SD序列、PL启动子、及rrnB终止子序列。