百日咳抗原之纯化法

摘要

提供一种用百日咳博德特氏菌(Bordetella pertussis)液体培养基进行生产淋巴细胞增多促进素(LPF)，丝状血细胞凝集素(FHA)以及至少一种线毛(fimbrial)凝集原的方法，它包括(a)将培养物分为细胞部分和上清液部分，(b)浓缩上清液部分，(c)分级分离经浓缩的上清液部分以分离出含有LPF和FHA的部分，以及(d)从细胞部分分离出至少一种线毛凝集原。可以混合所产生的LPF、FHA及线毛凝集原生产一种疫苗组合物。

主权项

1﹒一种用百日咳博德特氏菌的液体培养基共同生产淋巴细胞增多促进因素(LPF),丝状血凝素(FHA),以及至少一种线毛凝集原的方法,它包括以下各步骤:(a)将培养物分成细胞部分和上清液部分,在PH范围介乎7﹒5-9﹒0之间进行,(b)在步骤(a)之后浓缩上清液部分至其原体积50%以下,以形成水含量减少之浓缩含水一清液部份,(C)在步骤(b)之后,分级分离已浓缩的上清液部分以分离出含有LPF及FHA的部分,以及(d)自细胞部分至少分离出一种线毛凝集原。2﹒根据申请专利范围第1项之方法,其中在(d)步骤分离的线毛凝集原至少包括凝集原2及3(Ag2+3)3﹒根据申请专利范围第1或2项之方法,其中分离步骤(b)中上清液浓缩为小于原体积50%,以小于25%较佳。4﹒根据申请专利范围第1或2项之方法,其中在步骤(c)含有LPF的部分是用胎球蛋白琼脂糖吸附而纯化,接着用氧化镁缓冲液洗提。5﹒一种生产包括淋巴细胞增多促进因素(LPF),丝状血凝素(FHA)以及至少一种线毛凝集原的疫曲组合物的方法,其包括混合申请专利范围第1或2项生产的(i)LPF(ii)FHA及(iii)至少一种线毛凝集原,以及在混合前或后将LPF,FHA及至少一种线毛凝集原解毒。