一种L–离胺酸氧化 之制备方法

摘要

本发明系关于一种Ｌ－离胺酸氧化的制备方法，尤其系指利用假性康宁木霉菌(Trichoderma pseudokoningii)生产Ｌ－离胺酸氧化的方法。本发明系用固体培养法进行制备，利用适当形态之固体培养基，在温度约为18－32℃，pH约为４－８之间之条件，可在约５－20天之时间即可制备得Ｌ－离胺酸氧化(L-lysine oxidase)。

主权项

1.一种利用CCRC 35132假性康宁木霉(Trichodermapseudokoningii)制备L-离酸氧化 之方法:(a)选择一适当形态之固体培养基,即将麸皮、米糠或玉米等加上适当之水分及其他可供菌株利用之碳源;(b)于固体培艺基上接入假康宁木霉菌,并于温度介于18-32℃及pH为4-8进行培养至生长满菌丝;(c)加入缓冲液抽取酵素,并加入硫酸 沈淀酵素(d)离心上述(c)步骤之沈淀物并加入缓冲液于沈淀物中再进行透析;(e)以管柱色层分析精制(d)步骤所获得之产物;其中所制得之L-离 酸氧化 之分子量为125,000(5,000),由2个相同次单元构成,等电点为4.24(0.2),每分子酵素带有2分子之黄素腺 呤二核 酸(FAD),对L-离 酸之反应性特别高,其最适反应pH在6-7。2.如申请专利范围第1项之方法,其中在进行培养之步骤