一种从葡萄籽中提取原花青素的方法

摘要

本申请旨在提供一种提取高纯度寡聚原花青素的方法，包括以下步骤：将脱脂后的葡萄籽粉碎，加入乙酸乙酯超声萃取后得粗提物Ⅰ，加入纤维素酶进行酶解，再经过两次乙酸乙酯萃取，分别得粗提物Ⅱ、粗提物Ⅲ；合并以上粗提物进行纯化，得纯度95%以上的寡聚原花青素；本发明所述方法采用多轮萃取、萃取物低温避光保存的办法，避免了寡聚原花青素长时间暴露，从而减少了寡聚原花青素的氧化和过多的原花青素被降解为无活性的单体；本发明所述方法的后续纯化处理步骤较为简单，省去了本领域常用的大孔吸附树脂纯化、HPLC精制等步骤，节约了大量溶剂，更加环保。

主权项

一种从葡萄籽中提取原花青素的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)葡萄籽的预处理：葡萄籽脱脂，脱脂后剩余物粉碎至20‑80目颗粒待用；(2)第一轮萃取：向葡萄籽颗粒中加入其重量10‑15倍的乙酸乙酯，在超声条件下萃取30‑40min；(3)酶解：过滤分离葡萄籽颗粒与乙酸乙酯，其中滤液减压浓缩，回收乙酸乙酯，得粗提物Ⅰ，粗提物Ⅰ低温避光保存；葡萄籽颗粒中加入其重量10‑15倍的纯净水，并加入纤维素酶，进行酶解，酶解时间为30‑40min，每隔10min进行超声处理2‑5min，酶解温度为40‑50℃，其中所述纤维素酶活力为10000‑50000U/g，纤维素酶加入量以葡萄籽颗粒为底物计40‑50U/g；(4)第二轮萃取：在含有葡萄籽颗粒的水溶液中加入葡萄籽颗粒重量10‑15倍的乙酸乙酯在超声条件下进行第二次萃取，萃取时间30‑40min，萃取完成后分离乙酸乙酯层，减压浓缩，回收乙酸乙酯，得粗提物Ⅱ，粗提物Ⅱ低温避光保存；(5)第三轮萃取：调节第二次萃取剩余含葡萄籽颗粒的水溶液的pH为2‑4，搅拌20‑80min，每隔20min使用葡萄籽颗粒重量10‑15倍的乙酸乙酯萃取一次，分离萃取液，减压浓缩，回收乙酸乙酯，得粗提物，将粗提物低温避光保存，将该步骤中所得的全部粗提物合并得到粗提物Ⅲ；(6)纯化：合并粗提物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ，并加入其总重量30‑40倍的乙酸乙酯，搅拌，滤除不溶物后，减压浓缩回收乙酸乙酯，得纯度95％以上的寡聚原花青素。