发明名称 一种生物除臭净化剂及其用途
摘要 本发明涉及一种生物除臭净化剂,其为由安全、高效、有益的酵母菌、乳酸菌、固氮菌、功能芽孢杆菌和光合细菌合理配伍而成,这些菌种均符合我国《肥料登记资料要求》中菌种安全鉴定分级目录公布的以及美国食品药物管理局和美国饲料管理协会公布的和我国农业部公布的饲料用微生物菌种,符合GRAS(generalregardassafety)标准。该生物除臭净化剂可应用于处理陈腐生活垃圾除臭制肥、处理畜禽粪便除臭制肥、海洋废弃物除臭制肥、畜禽屠宰加工废弃物除臭制肥、鲜活生活垃圾除臭制肥,以及应用于动物圈舍除臭、污水除臭净化和在鱼虾蟹鳗等水产动物养殖水质的生物净化和活化。
申请公布号 CN100375637C 申请公布日期 2008.03.19
申请号 CN200510069515.8 申请日期 2005.05.12
申请人 中国农业大学 发明人 张日俊;李菊
分类号 A61L9/01(2006.01);A61L11/00(2006.01);C02F3/34(2006.01);B09B5/00(2006.01);C12N1/00(2006.01);A61L101/52(2006.01) 主分类号 A61L9/01(2006.01)
代理机构 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 代理人 王凤华
主权项 1.一种生物除臭净化剂,其为产朊假丝酵母菌发酵液、乳酸菌发酵液、固氮菌发酵液、功能芽孢杆菌发酵液和沼泽红假单胞菌发酵液配伍而成的pH≤5.0的酸性混合液;所述各组分的体积份配比为:产朊假丝酵母菌发酵液10~40;乳酸菌发酵液10~20;功能芽孢杆菌发酵液10~40;固氮菌发酵液10~20;沼泽红假单胞菌发酵液10~30;且5类微生物发酵液的活菌总和≥109/毫升;所述的产朊假丝酵母发酵液为使用产朊假丝酵母菌种,按同于申请号为200410031196.7的专利中公开的酿酒酵母发酵液的培养方法制得;所述的乳酸杆菌发酵液为使用乳杆菌R1或乳酸链球菌R2菌种,按同于申请号为200410031196.7的专利中公开的乳酸杆菌发酵液的培养方法制得;所述的功能芽孢杆菌发酵液为使用巨大芽孢杆菌Y1、蜡状芽孢杆菌Y2、胶质芽孢杆菌Y3和枯草芽孢杆菌Y4菌种,按同于申请号为200410031196.7的专利中公开的枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌发酵液的培养方法分别制得,然后按3~5∶3~5∶3~5∶1~3体积比混合而成;所述的固氮菌发酵液为使用茎瘤固氮根瘤菌G1、褐球固氮菌G2、棕色固氮菌G3或印度贝氏固氮菌G4菌种,按下述方法培养制得:1)平板培养复壮:将G1、G2、G3或G4固氮菌菌种分别采用划线接种的方法在固氮菌平板培养基上划线接种,于25~30℃培养24~36h,使其复壮,并形成单菌落;所述的固氮菌平板培养基为按下述比例配制的混合物:K2HPO4 0.05~0.1g,MgSO4·7H2O 0.02~0.05g,NaCl 0.01~0.03g,CaSO4.2H2O 0.01~0.02g,CaCO3 0.3~0.6g,FeCl3 0.001~0.002g,CaCl2 0.01~0.02g,NaNO3 0.04~0.07g,甘露糖0.2~0.4g,琼脂粉1.5~2.5g,100ml水,pH6.5~7.4,121℃灭菌30分钟,冷却备用;2)制作摇瓶种子:从步骤1)培养的G1、G2、G3、G4固氮菌菌落中分别挑单菌落,接种到固氮菌液体培养基中,于25~32℃培养12~24小时,得到摇瓶种子液;所述的固氮菌液体培养基为按下述比例配制的混合液:K2HPO4 0.05~0.1g,MgSO4·7H2O 0.02~0.05g,NaCl 0.01~0.03g,CaSO4.2H2O 0.01~0.02g,CaCO3 0.3~0.6g,FeCl3 0.001~0.002g,CaCl2 0.01~0.02g,NaNO3 0.04~0.07g,甘露糖0.2~0.4g,100ml水,pH7.0~7.5,121℃灭菌30分钟,冷却备用;3)生产一级种子液:将步骤2)得到的固氮菌摇瓶种子液以2~5v%的接种量,分别接种于固氮菌一级种子液体培养基中,于26~32℃培养16~60h,搅拌速度150~200rpm,通气量为1~2vvm,得到固氮菌的一级种子液;所述的固氮菌一级种子液体培养基为按下述比例配制的混合液:糖蜜2~4g,豆粕粉0.1~0.4g,葡萄糖0.1~0.4g,K2HPO4 0.1~0.4g,Na2HPO4 0.1~0.3g,NaCl 0.1~0.3g,NaOH 0.1~0.30g,生长因子A 0.05~0.2ml,消泡剂0.05~0.1g,100ml水,pH=7.0~7.6,121℃灭菌30~45分钟,冷却到32~37℃备用;所述的生长因子A为按下述比例配制的混合液:MgSO4·7H2O 20~35g,CaCl2·2H2O 2.0~5.0g,ZnSO4·7H2O 0.5~1.5g,FeSO4·7H2O 0.1~0.8g,MnSO4·H2O0.1~0.3g,CuSO4·5H2O 0.01~0.05g,Co(NO3)2 0.02~0.05g,Na2B4O7·10H2O 0.01~0.04g,(NH4)6MO7O24·4H2O 0.01~0.03g,1000ml水;4)二级发酵:将步骤3)得到的G1、G2、G3、G4固氮菌一级种子液,分别以5~10%的体积比接种到发酵培养液中,所述的发酵培养液同于步骤3)的固氮菌一级种子液体培养基,培养条件同于步骤3),发酵18~60小时后,检测固氮菌数达到30亿/ml时停止发酵,制得固氮菌发酵液;所述的沼泽红假单胞菌发酵液为使用沼泽红假单胞菌菌种,按下述方法培养制得:1)平板培养复壮:将沼泽红假单胞菌斜面种子采用划线接种的方法在沼泽红假单胞菌平板培养基上划线接种,于厌氧环境25~33℃下培养24~36小时,使沼泽红假单胞菌复壮,并形成单菌落;所述的沼泽红假单胞菌平板培养基为按下述比例配制的混合物:NaCl 0.05~0.2g,CH3COONa 0.1~0.3g,MgSO4·7H2O 0.05~0.1g,KH2PO4 0.05~0.1g,(NH4)2SO4 0.05~0.2g,CaCl2 0.005~0.01g,酵母粉0.05~0.2g,琼脂粉1.5~2.5g,100ml水,pH=6.5~7.2,121℃灭菌30分钟,冷却备用;2)制作摇瓶种子:将步骤1)培养的沼泽红假单胞菌菌落中挑单菌落,接种到沼泽红假单胞菌液体培养基中,于28~33℃培养24~36小时,得到沼泽红假单胞菌摇瓶种子;所述的沼泽红假单胞菌液体培养基为按下述比例配制的混合液:NaCl 0.05~0.2g,CH3COONa 0.1~0.3g,MgSO4·7H2O 0.05~0.1g,KH2PO4 0.05~0.1g,(NH4)2SO4 0.05~0.2g,CaCl20.005~0.01g,酵母粉0.05~0.2g,100ml水,pH=6.5~7.2,121℃灭菌30分钟,冷却备用;3)生产一级种子液:将步骤2)得到的沼泽红假单胞菌摇瓶种子以6~12v%的接种量,接种于沼泽红假单胞菌一级种子液体培养基中,于厌氧环境28~33℃培养17~60h,光照强度为2000 lx,直至沼泽红假单胞菌数达到30亿,得到沼泽红假单胞菌的一级种子液;所述沼泽红假单胞菌一级种子液体培养基为按下述比例配制的混合液:NH4Cl0.05~0.15g,NaHCO3 0.05~0.15g,K2HPO4 0.01~0.04g,CH3COONa 0.1~0.8g,MgSO4·7H2O 0.01~0.04g,NaCl 0.05~0.3g,微量元素贮液1ml,生长辅助因子贮液0.1ml,100ml水,pH=6.5~7.2,121℃灭菌30分钟,冷却到32~37℃备用;所述的微量元素贮液为FeCl3·6H2O 5mg,H3BO3 1mg,ZnSO4·7H2O 1mg,CuSO4·5H2O 0.05g,MnCl2·4H2O 0.05g,Co(NO3)2·6H2O 0.5g,1000ml水;所述的生长辅助因子贮液为VB1 5~20mg,烟酸5~10mg,生长素0.5~2mg,蛋白胨0.5~2.0g,酵母浸膏2~3g,1000ml水;4)二级发酵:将步骤3)得到的沼泽红假单胞菌一级种子液,以5~10%体积比接种到发酵培养液中,所述的发酵培养液同于步骤3)的沼泽红假单胞菌一级种子液体培养基,培养条件同于步骤3),发酵17~60小时后,检测沼泽红假单胞菌数已达到30亿/ml发酵液时停止发酵,制得沼泽红假单胞菌发酵液。
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