| 主权项 |
1.一种微量细胞核酸检测晶片之方法,其步骤包括: a.选定一尼龙模晶片,利用一手动打点机,将所需之 基因核酸片段整齐排列点阵于晶片上; b.手动打点后自然烘乾,再以一核酸快速固着器( cross-linker),将核酸片段固着于尼龙模上,即完成 晶片制备; c.收集一般血液作为检体; d.萃取上述血液中之核糖核酸并进行线性放大; e.反转录试验合成足量所需之互补去氧核糖核(cDNA )并加以标志,使其形成一作为探针之标志物; f.将上述之晶片与标志物进行探针标志反应、杂 交反应(Hybridization)以及杂交后反应(Post-Hybri- dization)处理; g.将上述杂交后反应之晶片与标志物进行化学呈 色反应; h.将上述化学呈色反应后之影像结果进行自动化 分析。 2.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该手动打点机系包括有一底 座、一设置于底座上之晶片放置层、一设置于晶 片放置层上之晶片固定层、及一设置于晶片固定 层上之打点层所构成。 3.依据申请专利范围第2项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该晶片放置层及打点层之一 侧系以一夹层枢纽加以连接,藉以使该打点层可作 开启之动作。 4.依据申请专利范围第2项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该打点层之适当处系设置有 一启动手把。 5.依据申请专利范围第2项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该打点层之正中央处系设置 有多数个孔洞,而该正中央处系选取4.54.5 cm的区 块,并以3mm的孔距制备出196个(行:14;列:14)内径1.2mm 的孔洞,做为之后微量吸取管插入处(即打点处)。 6.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该所需之基因核酸片段系 以二次水泡制成200M以100nl整齐排列点阵于晶片 上。 7.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,系利用手动打点机将每一基 因核酸片段以100nl之大小、1.5mm间距点阵排列于 晶片上。 8.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该核酸快速固着器系以1200焦 耳之高能量进行交叉结合(crosslink),而将核酸片 段固着于尼龙模上。 9.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该步骤c仅需收集1c.c的血液检 体即可进行检测。 10.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该探针标志反应时间及杂交 反应时间系为24小时。 11.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,该杂交后反应处理时,其侦测( Detection)的时间为30分钟。 12.依据申请专利范围第1项所述之微量细胞核酸检 测晶片之方法,其中,分析该步骤h之影像结果的密 度分析软体系为Alpha Ease FC Stand Alone,及GeneTACTM Integrator择其一。 图式简单说明: 第1图,系本发明之流程方块示意图。 第2图,手动打点机之立体外观示意图。 第3图,手动打点机之立体分解示意图。 第4图,生物统计软体分析实验结果示意图。 第5图,K-ras致癌基因稳定转染之人类肾上腺皮质细 胞株实验结果示意图。 第6图,系本发明利用微量细胞核酸检测晶片技术 平台检测各种癌症病人血液中细胞与特定基因群 之反应表现示意图。 |
