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본 발명은 하기 단계를 포함하는, 유도된 다능성 줄기 세포 (iPS)-유도성 뉴런의 신경독소 폴리펩티드에 대한 감수성의 표준화 방법에 관한 것이다: a) 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들을 GT1b 를 함유하는 세포 배양 배지에서 3 시간 이상 배양하는 단계; b) 단계 a) 의 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들을 신경독소 폴리펩티드와 접촉시키는 단계; c) 단계 b) 의 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들을 신경독소 폴리펩티드로 하여금 그의 생물학적 활성을 발휘하도록 하는 조건 하에 GT1b 의 존재 하에 24 시간 이상 동안 배양하는 단계; 이로써, 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 신경독소 폴리펩티드에 대한 감수성을 표준화하게 됨. 본 발명은 추가로, 하기 단계를 포함하는, 신경독소 폴리펩티드에 대한 감수성이 표준화된 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 생성 방법에 관한 것이다: a) 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들을 제공하는 단계; b) 단계 a) 의 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들을 GT1b 를 함유하는 세포 배양 배지에서 3 시간 이상 배양하는 단계, 이로써 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 신경독소 폴리펩티드에 대한 감수성을 표준화하게 됨. 추가로, 본 발명에는 하기 단계를 포함하는 신경독소 폴리펩티드의 생물학적 활성을 결정하는 방법이 포함된다: a)유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런을 GT1b 을 함유하는 세포 배양 배지에서 3 시간 이상 배양하는 단계; b) 단계 a) 의 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런을 신경독소 폴리펩티드와 접촉시키는 단계; c) 단계 b) 의 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런을 신경독소 폴리펩티드로 하여금 그의 생물학적 활성을 발휘하도록 하는 조건 하에 GT1b 의 존재 하에 24 시간 이상 동안 배양하는 단계; 및 d) 신경독소 폴리펩티드의 상기 세포에서의 생물학적 활성을 결정하는 단계. 최종적으로 본 발명은 이하 기재된 것을 목적으로 하는 GT1b 의 용도에 관한 것이다: a) 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들의 신경독소 폴리펩티드에 대한 감수성 결정; 또는 b) 유도된 다능성 줄기 세포-유도성 뉴런의 상이한 회분들의 신경독소 폴리펩티드에 대한 감수성의 변동성 감소. |
