Genotyping method for the mouse leptin receptor mutation

摘要

동형접합체 불임을 나타내는 마우스 모델을 유지하는데 있어서 빠르고 효과적인 유전자형 확인이 매우 중요하다. 동형접합체 불임을 나타내는 렙틴 수용체 돌연변이 (C57BL/KsJ-) 마우스는 비인슐린 의존적 당뇨병 동물모델로 일반적으로 이용되고 있다. 본 발명자들은 C57BL/KsJ-마우스의 빠르고 효과적인 유전자형 확인을 위해 테트라-프라이머 ARMS-PCR 방법을 이용하였다. 정상 () 마우스로부터 407bp 및 199bp PCR 산물이 증폭되었고; 반면, 동형접합체 () 마우스에서는 407bp 및 268bp PCR 산물이 증폭되었으며; 이형접합체 () 마우스에서는 497bp, 268bp 및 199bp PCR 산물이 증폭되었다. 뿐만 아니라, 테트라-프라이머 ARMS-PCR 분석법은 C57BL/6J 유전자 배경을 갖는 다른 마우스에서도 효과적이었다. 테트라-프라이머 ARMS-PCR 분석법은 1) C57BL/KsJ-를 계통 유지하는데 유용하며, 2) 효율적으로 실험에 사용이 가능한 동형접합체(db/db)를 대량 생산에 유용하며, 3) 렙틴 수용체 돌연변이를 포함하는 이중 녹아웃 마우스를 고속 대량생산하는데 유용하다.