复合物理场协同强化菜籽蛋白糖基化改性的方法

摘要

本发明公开了一种复合物理场协同强化菜籽蛋白糖基化改性的方法，包括如下步骤：1)菜籽蛋白的制备；2)菜籽蛋白溶液的配制；3)蛋白质‑糖混合溶液的配制；4)微波‑超声波复合物理场协同处理；5)离心分离；6)透析与干燥。其中，步骤3)中，微波的功率为200～500W，超声波的功率为100～300W，反应体系的温度为60～70℃，反应时间为6～10min。本发明利用微波快速加热效应和超声波的机械搅拌与加速扩散作用，可避免反应体系出现局部高温现象，使糖基化反应更为均匀；同时微波的电磁场与超声波的空穴作用会在反应体系中形成超临界高温与高压的微环境及界面浓缩现象，从而避免传统湿热法下由于长时间持续高温作用而产生褐变物质，消除了色泽对产品的影响。

主权项

一种复合物理场协同强化菜籽蛋白糖基化改性的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：1)菜籽蛋白的制备：称取菜籽饼粕粉，按1:(8～15)的比例加入去离子水，在55～65℃下搅拌提取1～3h，并保持pH值为9.0～9.5，然后将浸提液在8000～10000rpm下离心20～30min，取上清液用1～2mol/L的盐酸溶液调节pH值为6.0～6.5，经离心后可得蛋白质沉淀，再将所得上清液继续用1～2mol/L的盐酸溶液调节pH值为3.5～4.5，离心后再次收集蛋白质沉淀；将两次离心所得蛋白质沉淀混匀后加去离子水洗涤，调节pH值为7.0进行复溶，经冷冻干燥后可得菜籽蛋白；2)菜籽蛋白溶液的配制：将步骤1)所制得的菜籽蛋白溶解于磷酸盐缓冲液中配制成浓度为6～10mg/mL的蛋白质溶液，充分搅拌均匀后，放置过夜，以使得菜籽蛋白充分水化；3)蛋白质‑糖混合溶液的配制：按质量比为1:(1～3)的比例将糖加入步骤2)所制得的菜籽蛋白溶液中，并在四通圆底烧瓶反应器中充分搅拌10～20min，混合均匀；4)微波‑超声波复合物理场协同处理：将步骤3)中所得糖与蛋白质的混合液放入微波‑超声波协同合成反应仪中，调节微波的功率为200～500W，超声波的功率为100～300W，控制反应体系的温度在60～70℃，反应时间为6～10min，反应结束后迅速冷却至室温；5)离心分离：将经步骤4)处理后的蛋白质‑糖混合溶液在转速3000rpm～5000rpm下离心以除去不溶性蛋白质和糖；6)透析与干燥：将步骤5)所得上清液放入截留分子量为10kDa的透析袋中在去离子水中透析10～20h以除去无机盐，经干燥处理后可得糖基化菜籽蛋白产物。