发明名称 具有效密度及方向性之蛋白质或胜固定方法
摘要 本发明系关于一种具有效密度及方向性之蛋白质固定方法,主要系将多官能基聚合分子共价键结于有官能基之基材上,使形成一结合层,再将欲结合之蛋白质或胜共价键结于该结合层之上形成反应层。本发明使得蛋白质或胜之固定量提高并可控制结合之方向性及有效性以提高侦测灵敏度。本发明亦关于利用前述方法所制备之蛋白质晶片及其应用。
申请公布号 TWI285220 申请公布日期 2007.08.11
申请号 TW093119427 申请日期 2004.06.30
申请人 国立成功大学 发明人 黄玲惠
分类号 C12Q1/00(2006.01) 主分类号 C12Q1/00(2006.01)
代理机构 代理人 郭雨岚 台北市大安区仁爱路3段136号15楼;林发立 台北市大安区仁爱路3段136号15楼
主权项 1.一种具有效密度及方向性之蛋白质或胜固定 方法,系包括下列步骤: (a)提供一基材; (b)于前述基材之表面形成一修饰层,其中该修饰层 系具有至少一第一型官能基; (c)于前述修饰层上形成一结合层,该结合层之材料 系为多官能基聚合分子,该多官能基聚合分子具有 一个第二型官能基及至少二第三型官能基,该第二 型官能基系与前述修饰层之第一型官能基形成共 价键结;以及 (d)于前述结合层上形成一反应层,该反应层之材料 系为欲结合之蛋白质或胜,前述蛋白质或胜系 与前述修饰层之多官能基聚合分子的第三型官能 基形成共价键结。 2.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述步骤 (b)之修饰层之第一型官能基系为一级胺。 3.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述步骤 (b)之修饰层之第一型官能基系为二级胺。 4.如申请专利范围第2项所述之方法,当前述步骤(b) 修饰层之第一型官能基为一级胺时,前述步骤(c)之 多官能基聚合分子为聚离胺酸。 5.如申请专利范围第3项所述之方法,当前述步骤(b) 修饰层之第一型官能基为二级胺时,前述步骤(c)之 多官能基聚合分子为聚离胺酸。 6.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述步骤 (b)修饰层之第一型官能基系为羧基。 7.如申请专利范围第6项所述之方法,当前述步骤(b) 之修饰层之第一型官能基为羧基时,前述步骤(c)之 多官能基聚合分子为聚麸胺酸。 8.如申请专利范围第4或第5项所述之方法,其中前 述聚离胺酸系经乙酯化处理。 9.如申请专利范围第4或第5项所述之方法,其中前 述聚离胺酸系未经乙酯化处理。 10.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述步 骤(d)之欲结合之蛋白质系可经过处理或未经处理 。 11.如申请专利范围第10项所述之方法,其中前述处 理系指将该蛋白质之部份醣基氧化成醛基。 12.如申请专利范围第10项所述之方法,其中前述处 理系指将该蛋白质与过碘酸钠共同反应。 13.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述步 骤(d)之蛋白质种类系包括:抗原、抗体、酵素、毒 物分子、配体、受体或免疫球蛋白。 14.一种具有效密度及方向性之蛋白质晶片,包括: 一基材; 一修饰层,系位于前述基材上,其中该修饰层系具 有至少一第一型官能基; 一结合层,该结合层之材料系为多官能基聚合分子 ,该多官能基聚合分子具有一个第二型官能基及至 少二第三型官能基,该第二型官能基系与前述修饰 层之第一型官能基形成共价键结;以及 一反应层,该反应层之材料系为欲结合之蛋白质或 胜,前述蛋白质或胜系与前述修饰层之多官能 基聚合分子的第三型官能基形成共价键结。 15.如申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片,其中 前述修饰层系于基材上修饰官能基或由基材表面 之材质而形成。 16.如申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片,其中 前述第一型官能基系为一级胺。 17.如申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片,其中 前述第一型官能基系为二级胺。 18.如申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片,其中 前述第一型官能基系为羧基。 19.如申请专利范围第16项所述之蛋白质晶片,当前 述修饰层之第一型官能基为一级胺时,前述结合层 之多官能基聚合分子为聚离胺酸。 20.如申请专利范围第17项所述之蛋白质晶片,当前 述修饰层之第一型官能基为二级胺时,前述结合层 之多官能基聚合分子为聚离胺酸。 21.如申请专利范围第18项所述之蛋白质晶片,当前 述修饰层之第一型官能基为羧基时,前述结合层之 多官能基聚合分子为聚麸胺酸。 22.如申请专利范围第19或第20项所述之蛋白质晶片 ,其中前述聚离胺酸系经乙酯化处理。 23.如申请专利范围第19或20项所述之蛋白质晶片, 其中前述聚离胺酸系未经乙酯化处理。 24.如申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片,其中 前述欲结合之蛋白质系可经处理或未经处理。 25.如申请专利范围第24项所述之蛋白质晶片,其中 前述处理系指将该蛋白质之部份醣基氧化成醛基 。 26.如申请专利范围第24项所述之蛋白质晶片,其中 前述处理系指将该蛋白质与过碘酸钠共同反应。 27.如申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片,其中 前述之蛋白质种类系包括:抗原、抗体、酵素、毒 物分子、配体、受体及免疫球蛋白。 28.一种用于蛋白质辨识之检测套组,系包括申请专 利范围第14项所述之蛋白质晶片。 29.一种辨识特定蛋白质之方法,系包括下列步骤: 提供包括申请专利范围第14项所述之蛋白质晶片, 其中前述蛋白质晶片系已固定蛋白质以作为反应 层; 将前述蛋白质晶片与待辨识之蛋白质溶液共同反 应,使得特定蛋白质与前述反应层进行特异性结合 ;以及 侦测及判读反应结果。 30.如申请专利范围第29项所述之方法,其中利用前 述方法可辨识之蛋白质种类系包括抗原、抗体、 酵素、毒物分子、配体、受体、免疫球蛋白或胜 等。 图式简单说明: 第一图为习知之蛋白质固定机制之简单示意图。 第二图为本发明之蛋白质固定机制之简单示意图 。 第三图为本发明蛋白质晶片之结构剖面示意图。
地址 台南市东区大学路1号