水产品中无机砷的测定方法

摘要

一种水产品中无机砷的测定方法，水产品中的无机砷用(1+1)的盐酸溶液提取后，通过阴离子交换色谱柱，由流动相将亚砷酸盐As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸盐As(V)依次洗脱，由于阴离子交换色谱柱对砷酸盐As(V)、亚砷酸盐As(III)、一甲基砷化合物MMA、二甲基砷化合物DMA和砷糖AsS的吸附能力不同，洗脱的溶液经过硼氢化钾还原剂和盐酸发生氢化反应，生成氢化物进入原子化器，与原子荧光联用进行分析测定；该实验条件选择合理，检测数据准确可靠，不受浸提时间和温度影响；本发明既能准确测无机砷iAs，同时也能测定有机砷一甲基砷化合物MMA和二甲基砷化合物DMA，可以应用于水产品中砷的形态测定。

主权项

1、一种水产品中无机砷的测定方法，其特征在于它的方法为高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱HPLC-HGAFS联用形态分析方法，包括：(1)、选用的仪器及设备，(2)、配置试剂与标准溶液，(3)、进行测试步骤，(4)、实验所用的仪器条件，(5)、结果计算；(1)、仪器及设备：HPLC-HGAFS联用系统；1)、HPLC部分，使用LC-10ATVP高压液相泵；配有100μL定量环的7725i六通进样阀；配有相同材质填料保护柱25mm×2.3mm i.d，12-20μm的PRP-X100250mm×4.1mm i.d，10μm阴离子交换柱：2)、HGAFS-9130原子荧光光谱仪；配有激发光源：高性能砷空心阴极灯；形态分析测量软件：3)、SHA-C水浴恒温振荡器；4)、SH/T0093砂芯过滤器；5)、SHZ-D循环式真空泵；6)、DELTA320酸度计；7)、KQ-600DE数控超声清洗器；8)、0.45μm水系微孔滤膜；9)、氩气：纯度≥99.99％：(2)、配置试剂与标准溶液；1)、试剂；a、①、50％的盐酸溶液，量取250mL浓盐酸，慢慢加入250mL水中，混匀；②、7％的盐酸溶液：量取280mL盐酸，慢慢加入3720mL水中，混匀：b、5g/L的氢氧化钾溶液：称取氢氧化钾5g溶于水中，并稀释至1000mL：c、15g/L的硼氢化钾溶液；取硼氢化钾15g溶于1000mL的5g/L氢氧化钾溶液中：d、HPLC流动相为15mmol/L(NH4)2HPO4溶液，pH用10％甲酸调节至6，使用之前需经过0.45μm滤膜过滤并超声脱气：所有的试剂均是分析纯或是优级纯，整个实验都使用超纯水；玻璃仪器使用前需经15％硝酸浸泡24h；2)、砷的混合标准溶液：CH3AsO(ONa)2·6H2O(MMA)和Na2HAsO4·7H2OAs(v)，(CH3)2AsO2H(DMA)，1000μg/mL的As(III)标准储备溶液：a、通过溶解相应量的MMA、DMA、As(V)得到100ppb/mL的各单标溶液；将As(III)也稀释至100ppb/mL，以上四种标液可在4℃冰箱存放备用：b、混合砷标准溶液稀释配制，临用时现配：将以上四种标液逐级稀释至100mg/mL混合标准溶液，再根据下表1配制：表1 序号 浓度 mg/mL 定容体 积/mL 加入水 体积/mL 加入 10％HCl体 积/mL 加入100mg/mL四 种砷形态混合标准 溶液的体积/mL 1 5 10 7.0 2.5 0.5 2 20 10 4.5 2.5 2.0 3 50 10 2.5 2.5 5.0 4 75 10 / 2.5 7.5(3)、进行测试步骤：取经粉碎过40目筛的水产品干样0.300g-3.000g于50mL具塞刻度试管中，加50％盐酸的溶液20mL混匀，或取捣碎匀浆鲜样2.000g-5.000g于50mL具塞刻度试管中，并用盐酸(50％)溶液定容至25mL，混匀；至70℃水浴摇床1h，使试样充分浸提；取出冷却定容至25ml，脱脂棉过滤；取0.2mL上清液加入10ml管中；加入3.4mLH2O；0.4mLH2O2混匀后在70℃度水浴放置20min，使As(III)氧化成As(V)；取出后用0.45微米的水系微孔滤膜过滤，上机测定无机砷值：(4)、实验所用的仪器条件；1)、HPLC液相色谱条件：流动相15mmol/L(NH4)2HPO4(pH 6.0)，流速1mL/min；进样体积100μL；辅阴极46mA；蠕动泵转速65rpm；2)、HG氢化物发生条件：还原剂成分：1.5％KBH4+0.5％KOH，流速：6.0mL/min；载流成分：7％HCl，流速：6.0mL/min；3)、AFS原子荧光光谱条件：灯高性能砷空心阴极灯，193.7nm；负高压285V；灯电流100mA；载气氩气，400mL/min；屏蔽气氩气，600mL/min；(5)、结果计算：1)、定性：开机后按上述条件进行设置，待稳定后，先做标准曲线，然后测定处理好的样品溶液；在上述液相色谱和原子荧光条件下用进样针吸取0.3-0.5mL，采用手动进样器进行测定，用峰高或峰面积外标法定量；在上述色谱条件下亚砷酸盐As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸盐As(V)依次保留时间约为2.599min、3.221min、5.075min、8.994min；2)、定量：待测样品中亚砷酸盐As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸盐As(V)的色谱峰保留时间与标准溶液相比变化范围在±5％之内即认为该待测定物质；结果计算与表述：用数据处理软件中的外标法，绘制标准工作曲线，将标准工作曲线保存，然后将样品峰分析处理，用外标校正，即可得到待测溶液中的亚砷酸盐As(III)、二甲基砷化合物DMA、一甲基砷化合物MMA、砷酸盐As(V)的浓度，按下面式(1)计算，可得试样中待测物的含量：X＝C×V×F/m×1000............... (1)式中：X-样品中待测物的含量，mg/kg；C-待测液中无机砷的浓度，ng/ml；m-称样量，g；V-测定液体总体积，mL；F-稀释倍数。