一种融合防龋DNA疫苗及制备方法

摘要

本发明公开了一种融合防龋DNA疫苗及制备方法，大肠杆菌(Esherichiacoli)CCTCC NO：M201042。采用PCR方法，从携带有变形链球菌GS-5株葡糖基转移酶GTF-I的基因gtfB的质粒pYNB13中扩增出编码葡聚糖结合区的序列GLU，并克隆到真核载体pCI中，构建出真核表达质粒pGLU。经DNA序列测定，证实其插入序列的正确性。再将pCIA-P质粒中的变形链球菌表面蛋白PAc的A区和P区的A-P片段序列与pGLU质粒连接，构建出GTF-PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。本发明方法简单，生产成本低廉，免疫应答持久，有效防龋。

主权项

1、一种融合防龋DNA疫苗，其特征在于大肠杆菌Esherichia coli，CCTCCNO：M201042携带质粒pGLUA-P，DNA序列为：TCAATATTGGCCATTAGCCATATTATTCATTGGTTATATAGCATAAATCAATATTGGCTATTGGCCATTGCATACGTTGTATCTATATCATAATATGTACATTTATATTGGCTCATGTCCAATATGACCGCCATGTTGGCATTGATTATTGACTAGTTATTAATAGTAATCAATTACGGGGTCATTAGTTCATAGCCCATATATGGAGTTCCGCGTTACATAACTTACGGTAAATGGCCCGCCTGGCTGACCGCCCAACGACCCCCGCCCATTGACGTCAATAATGACGTATGTTCCCATAGTAACGCCAATAGGGACTTTCCATTGACGTCAATGGGTGGAGTATTTACGGTAAACTGCCCACTTGGCAGTACATCAAGTGTATCATATGCCAAGTCCGCCCCCTATTGACGTCAATGACGGTAAATGGCCCGCCTGGCATTATGCCCAGTACATGACCTTACGGGACTTTCCTACTTGGCAGTACATCTACGTATTAGTCATCGCTATTACCATGGTGATGCGGTTTTGGCAGTACACCAATGGGCGTGGATAGCGGTTTGACTCACGGGGATTTCCAAGTCTCCACCCCATTGACGTCAATGGGAGTTTGTTTTGGCACCAAAATCAACGGGACTTTCCAAAATGTCGTAATAACCCCGCCCCGTTGACGCAAATGGGCGGTAGGCGTGTACGGTGGGAGGTCTATATAAGCAGAGCTCGTTTAGTGAACCGTCAGATCACTAGAAGCTTTATTGCGGTAGTTTATCACAGTTAAATTGCTAACGCAGTCAGTGCTTCTGACACAACAGTCTCGAACTTAAGCTGCAGAAGTTGGTCGTGAGGCACTGGGCAGGTAAGTATCAAGGTTACAAGACAGGTTTAAGGAGACCAATAGAAACTGGGCTTGTCGAGACAGAGAAGACTCTTGCGTTTCTGATAGGCACCTATTGGTCTTACTGACATCCACTTTGCCTTTCTCTCCACAGGTGTCCACTCCCAGTTCAATTACAGCTCTTAAGGCTAGAGTACTTAATACGACTCACTATAGGCTAGCCTCGAGAATTCACGCGTGGTACCGGAGAAATGGGCTATCAAGCCAAAGGAAAATTTGTAACAACTGCCGATGGTAAAATAAGATATTTTGATAAGCAATCTGGGAACATGTACCGTAATCGTTTTATTGAAAACGAAGAAGGTAAATGGCTGTATCTCGGTGAAGATGGTGCAGCAGTGACAGGATCTCAAACCATTAACGGTCAACACCTGTACTTTAGAGCAAACGGTGTTCAGGTCAAGGGTGAATTTGTCACTGACCACCACGGCCGTATCAGCTATTACGACGGCAATTCAGGGGATCAAATCCGCAACCGCTTTGTCCGCAATGCTCAGGGTCAATGGTTCTACTTTGATAACAATGGCTATGCCGTAACCGGTGCCAGAACCATTAACGGTCAACTCCTATACTTTAGAGCAAACGGTGTTCAGGTCAAGGGTGAATTTGTCACTGACCGCTACGGCCGTATCAGCTATTACGACGGCAATTCAGGGGATCAAATCCGCAACCGCTTTGTCCGCAATGCTCAGGGTCAATGGTTCTACTTTGATAACAATGGCTATGCCGTAACCGGTGCCAGAACCATTAACGGTCAACACCTATACTTTAGAGCAAACGGTGTTCAGGTCAAGGGTGAATTTGTCACTGACCGCCACGGCCGTATCAGCTATTACGACGGCAATTCAGGGGATCAAATCCGCAACCGCTTTGTCCGCAATGCTCAGGGTCAATGGTTCTACTTTGATAACAATGGCTATGCCGTAACCGGTGCCAGAACCATTAACGGTCAACACCTATACTTTAGAGCAAACGGTGTTCAGGTCAAGGGTGAATTTGTCACTGACCGCTACGGCCGTATCAGTTATTACGATGCTAACTCTGGAGAACGAGTTCGGATTGTCGACCCTCGAGAAATGGCTGCCAATCAAGCAGCCTATCAAAAAGCCCTTGCTGCTTATCAGGCTGAACTGAAACGTGTTCAGGAAGCTAATGCAGCCGCCAAAGCCGCTTATGATACTGCTGTAGCAGCAAATAATGCCAAAAATACAGAAATTGCCGCTGCCAATGAAGAAATTAGAAAACGCAATGCAACGGCCAAAGCTGAATATGAGACTAAGTTAGCTCAATATCAAGCTGAACTAAAGCGTGTTCAGGAAGCTAATGCCGCAAACGAAGCAGACTATCAAGCTAAATTGACCGCCTATCAAACAGAGCTTGCTCGTGTTCAAAAAGCCAATGCGGATGCTAAAGCGACCTATGAAGCAGCTGTAGCAGCAAATAATGCCAAAAATGCGGCACTCACAGCTGAAAATACTGCAATTAAGCAACGCAATGAGAATGCTAAGGCGACTTATGAAGCTGCACTCAAGCAATATGAGGCCGATTTGGCAGCGGTGAAAAAAGCTAATGCCGCAAACGAAGCAGACTATCAAGCTAAATTGACCGCCTATCAAACAGAGCTCGCTCGCGTTCAAAAAGCCAATGCGGATGCTAAAGCGGCCTATGAAGCAGCTGTAGCAGCAAATAATGCCGCAAATGCAGCGCTCACAGCTGAAAATACTGCAATTAAGAAGCGCAATGCGGATGCTAAAGCTGATTACGAAGCAAAACTTGCTAAGTATCAAGCAGATCTTGCCAAATATCAAAAAGATTTAGCAGACTATCCAGTTAAGTTAAAGGCATACGAAGATGAACAAACTTCTATTAAAGCTGCACTGGCAGAACTTGAAAAACATAAAAATGAAGACGGAAACTTAACAGAACCATCTGCTCAAAATTTGGTCTATGATCTTGAGCCAAATGCGAACTTATCTTTGACAACAGATGGGAAGTTCCTTAAGGCTTCTGCTGTGGATGATGCTTTTAGCAAAAGCACTTCAAAAGCAAAATATGACCAAAAAATTCTTCAATTAGATGATCTAGATATCACTAACTTAGAACAATCTAATGATGTTGCTTCTTCTATGGAGCTTTATGGGAATTTTGGTGATAAAGCTGGCTGGTCAACGACAGTAAGCAATAACTCACAGGTTAAATGGGGATCGGTACTTTTAGAGCGCGGTCAAAGCGCAACAGCTACATACACTAACCTGCAGAATTCTTATTACAATGGTAAAAAGATTTCTAAAATTGTCTACAAGTATACAGTGGACCCTAAGTCCAAGTTTCAAGGTCAAAAGGTTTGGTTAGGTATTTTTACCGATCCAACTTTAGGTGTTTTTGCTTCTGCTTATACAGGTCAAGTTGAAAAAAACACTTCTATTTTTATTAAAAATGAATTCACTTTCTATCACGAAGATGAAAAACCAATTAATTTTGATAATGCCCTTCTCTCAGTGACTTCTCTTAACCGTGAACATAACTCTATTGAGATGGCTAAAGATTATAGTGGTAAATTTGTCAAAATCTCTGGTTCATCTATTGGTGAAAAGAATGGCATGATTTATGCTACAGATACTCTTAACTTTAAACAGGGTGAAGGTGGCTCTCGCTGGACTATGTATAAAAATAGTCAAGCTGGTTCAGGATGGGATAGTTCAGATGCGCCGAATTCTTGGTATGGAGCAGGGGCTATTAAAATGTCTGGTCCGAATAACCATGTTACTGTAGGAGCAACTTCTGCAACAAATGTAATGCCAGTTTCTGACATGCCTGTTGTTCCTGGTAAGGACAATACTGATGGCAAAAAACCAAATATTTGGTATTCTTTAAATGGTAAAATCCGTGCGGTTAATGTTCCTAAAGTTACTAAGGAAAAACCCACACCTCCGGTTAAACCAACAGCTCCAACTAAACCAACTTATGAAACAGAAAAGCCATTAAAACCGGCACCAGTAGCTCCAAATTATGAAAAGGAGCCAACACCGCCGACAAGGACACCGGATCAAGCAGAGCCAAACAAACCCACACCGCCGACCTATGAAACAGAAAAGCCGTTGGAGCCAGCACCTGTTGAGCCAAGCTATGAAGCAGAGCCAACACCGCCGACAAGGACACCGGATCAGGCAGAGCCAAATAAACCCACACCGCCGACCTATGAAACAGAAAAGCCGTTGGAGCCAGCACCTGTTGAGCCAAGCTATGAAGCAGAGCCAACGCCACCGACACCAACACCAGATCAACCAGAACCAAACAAACCTGTTGAGCCAACTTATGAGTAAGTCGACCCCGGGCGGCCGCTTCGAGCAGACATGATAAGATACATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGATGTGGGAGGTTTTTTAAAGCAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTAAAATCGATAAGGATCCGGGCTGGCGTAATAGCGAAGAGGCCCGCACCGATCGCCCTTCCCAACAGTTGCGCAGCCTGAATGGCGAATGGACGCGCCCTGTAGCGGCGCATTAAGCGCGGCGGGTGTGGTGGTTACGCGCAGCGTGACCGCTACACTTGCCAGCGCCCTAGCGCCCGCTCCTTTCGCTTTCTTCCCTTCCTTTCTCGCCACGTTCGCCGGCTTTCCCCGTCAAGCTCTAAATCGGGGGCTCCCTTTAGGGTTCCGATTTAGAGCTTTACGGCACCTCGACCGCAAAAAACTTGATTTGGGTGATGGTTCACGTAGTGGGCCATCGCCCTGATAGACGGTTTTTCGCCCTTTGACGTTGGAGTCCACGTTCTTTAATAGTGGACTCTTGTTCCAAACTGGAACAACACTCAACCCTATCTCGGTCTATTCTTTTGATTTATAAGGGATTTTGCCGATTTCGGCCTATTGGTTAAAAAATGAGCTGATT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