MAGE－1与IL－18共表达基因疫苗及其构建方法

摘要

MAGE－1基因的表达产物是一种肿瘤排斥抗原，该基因在多种恶性肿瘤中高度表达，而在除睾丸外的正常组织中不表达。因此，以MAGE－1为靶点的基因治疗具有广泛的应用前景。IL－18是新近发现的一种具有多种生物功能的细胞因子，是一种良好的免疫佐剂。以pcDNA3为载体，构建出两套表达启动系统，分别表达肿瘤抗原MAGE－1及免疫佐剂IL－18，可有效地增强DNA疫苗的免疫疗效。

主权项

1、一种IL-18共表达基因载体pcCMV-18的构建方法，其特征在于：以pcDNA3为真核表达载体，在制备重组表达质粒pcDNA3-IL-18的基础上，设计了一对引物(5’-AACAGATCTCGATGTACGGGCCAG-3’和5’-AAGTCGCGAATGACACCTACTCAG-3’)，上游者位于CMV启动子5’端，下游者位于polyA尾3’端。以pcIL-18为模板行PCR。并将PCR产物插入空质粒pcDNA3的BglII及NruI酶切位点之间。