检测结核菌和抗结核药物敏感性的方法及试剂盒

摘要

本发明提供一种检测结核菌的方法，包括抗体、抗原、酶标抗体的制备以及结合噬菌体扩增及酶联免疫放大技术检测噬菌体的存在。本发明还提供一种检测结核菌的试剂盒。用本发明提供的检测结核菌的方法及试剂盒，可在24小时内做出快速检测，且在检测敏感性、特异性和生物安全性等方面上均有显著提高，而且能准确提示活动性结核菌存在与否以及结核菌的药物敏感性。

主权项

1.一种检测结核菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)抗体的制备：将亲分枝杆菌的噬菌体注入兔子体内以产生抗噬菌体多克隆抗体；2)抗原的制备：a.痰样品的处理：将氢氧化钠、柠檬酸三钠与痰样品混合，孵育后获得的混合液与TS混合，孵育后离心收集沉淀物并用磷酸缓冲液洗涤，随后加入OCG-MBBacT强化营养液；b.结核菌纯化：将亲结核噬菌体加入上述处理完的痰样品中，随后加入硫酸亚铁铵杀病毒剂，混合、孵育、离心后收集沉淀物，并用磷酸缓冲液洗涤以去除多余的杀病毒剂；c.加入M.Smegmatis混悬液后孵育；3)酶标抗体的制备：采用辣根过氧化物酶标记抗体；4)ELISA检测：采用双抗体夹心法进行ELISA，检测痰样品的结核杆菌。