一种基于二氧化钛基二维纳米复合材料的电化学己烯雌酚传感器的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种基于二氧化钛基二维纳米复合材料的电化学己烯雌酚传感器的制备方法。属于新型纳米功能材料与生物传感器技术领域。本发明首先制备了一种新型二维片状的磁性纳米光敏材料FeCo‑N@TiO₂，利用该材料的良好的生物相容性、大的比表面积和铁磁性，负载上己烯雌酚抗体，然后通过戊二醛的交联作用固定辣根过氧化物酶，在进行检测时，由于辣根过氧化物酶可以催化过氧化氢，产生电化学信号，再利用抗体与抗原的特异性定量结合对电子传输能力的影响，使得电流强度相应降低，最终制得了成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速、制备简单的检测己烯雌酚的电化学生物传感器。

主权项

一种基于二氧化钛基二维纳米复合材料的电化学己烯雌酚传感器的制备方法，所述的二氧化钛基二维纳米复合材料为铁和钴双金属原位复合的氮掺杂二氧化钛纳米片FeCo‑N@TiO₂，所述的电化学己烯雌酚传感器由工作电极、FeCo‑N@TiO₂、己烯雌酚抗体、牛血清白蛋白、戊二醛、辣根过氧化物酶组成；其特征在于，所述的制备方法包括以下制备步骤：a. FeCo‑N@TiO₂的制备；b. 电化学己烯雌酚传感器的制备；其中，步骤a制备FeCo‑N@TiO₂的具体步骤为：首先，取0.8 mmol铁盐、0.8~1.2 mmol钴盐和1 mmol铵盐加入到5 mL钛酸四丁酯中，搅拌过程中，缓慢加入0.5~0.8 mL氢氟酸，160~200 ℃下在反应釜中反应18~24小时，冷却至室温后，用超纯水和无水乙醇离心洗涤三次后，50℃下真空干燥；然后，将研磨的粉末放入马弗炉中，升温速度为1~3 ℃/min，480~560℃下在氮气保护下，煅烧10~60 min；最后，将煅烧后的粉末冷却至室温，即制得FeCo‑N@TiO₂；所述的铁盐选自下列之一：硫酸铁、氯化铁、硝酸铁；所述的钴盐选自下列之一：硫酸钴、氯化钴、硝酸钴；所述的铵盐选自下列之一：硫酸铵、氯化铵、硝酸铵、碳酸铵；步骤b制备电化学己烯雌酚传感器的具体步骤为：（1）以玻碳电极为工作电极，在电极表面滴涂8~12 µL的FeCo‑N@TiO₂溶胶，室温下晾干；（2）将步骤（1）中得到的电极用缓冲溶液PBS清洗，继续在电极表面滴涂8~12 µL 10 µg/mL的己烯雌酚抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；（3）将步骤（2）中得到的电极用PBS清洗，继续在电极表面滴涂8~12 µL 浓度为100 µg/mL的牛血清白蛋白溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；（4）将步骤（3）中得到的电极用PBS清洗，继续在电极表面滴涂2~4 µL 的戊二醛溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；（5）将步骤（4）中得到的电极用PBS清洗，继续在电极表面滴涂6~10 µL 浓度为20 µg/mL的辣根过氧化物酶溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；（6）将步骤（5）中得到的电极用PBS清洗，在4 ℃ 冰箱中保存晾干后，即制得电化学己烯雌酚传感器；所述的FeCo‑N@TiO₂溶液为将50 mg 的FeCo‑N@TiO₂粉末溶于10 mL超纯水中，并超声30 min后制得的水溶胶；所述的PBS为10mmol/L的磷酸盐缓冲溶液，所述的磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.4；所述的戊二醛溶液为体积比为2.5%的戊二醛水溶液。