一种人的甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg<SUP>11</SUP>]]hPTH(1－34)－Pro－Pro

摘要

本发明提供了人甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro，及其构建方法和生产工艺。本发明所述的人甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro是一种前体肽，在机体内N端的两个脯氨酸残基会被切除，生成有生物活性的[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro。本发明还提供了[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro的产生方法。甲状旁腺素1－34肽相关肽的制备包含以下步骤：(a)在适合表达人甲状旁腺素1－34肽相关肽－Pro－Pro－[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro的条件下，培养含有权利要求3所述重组质粒pED－4P－[Arg¹¹]hPTH(1－34)的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有Pro－Pro－[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽片段的融合蛋白；(c)分离纯化出Pro－Pro－[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽；(d)借助体内的二肽酶IV等酶将Pro－Pro－[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽N端的两个脯氨酸残基切除，形成[Arg¹¹]hPTH(1－34)－Pro－Pro肽。本发明还提供了人甲状旁腺素1－34肽相关肽基因和氨基酸序列、载体和宿主细胞。本发明可高效简便地生产高纯度、高活力的人甲状旁腺素1－34肽相关肽。

主权项

1.一种重组人甲状旁腺素1-34肽相关肽，其特征在于，它具有SEQ ID NO：2所示氨基酸序列，即Pro Pro Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Arg Gly Lys His Leu Asn Ser Met Glu ArgVal Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe Pro Pro。