发明名称 |
一种枸杞菊花提取液培养晶状体上皮细胞的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种枸杞菊花提取液培养晶状体上皮细胞的方法,包括原料选取、枸杞提取液的制备、菊花提取液的制备、晶状体细胞培养液的制备、晶状体细胞的培养,与现有技术相比,本发明采用不同配比枸杞菊花提取液培养晶状体细胞,提高细胞增殖能力,减少氧化应激,降低细胞凋亡的细胞培养方法,可用于指导养肝明目用药的理论基础,具有推广应用的价值。 |
申请公布号 |
CN106148271A |
申请公布日期 |
2016.11.23 |
申请号 |
CN201610371357.X |
申请日期 |
2016.05.31 |
申请人 |
宁夏医科大学 |
发明人 |
牛阳;马会明;张红军;周波;任洁;马科;马惠昇;李婷婷;杨静 |
分类号 |
C12N5/071(2010.01)I |
主分类号 |
C12N5/071(2010.01)I |
代理机构 |
北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 |
代理人 |
汤东凤 |
主权项 |
一种枸杞菊花提取液培养晶状体上皮细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:原料选取:取宁夏枸杞10克,杭白菊5克;步骤二:枸杞提取液的制备:选取无蛀虫、无霉变的枸杞干果为原料,清洗晾干后,将每粒枸杞干果破碎成两瓣,并置于加热的容器(70℃‑90℃)内,之后向加热的容器中加入枸杞干果,重量10倍的水(100ml)进行静置浸泡5‑8小时,然后,加热煮沸至容器内水的体积减少一半,之后停止加热,过滤除渣,得到枸杞提取液,备用;步骤三:菊花提取液的制备:选取菊花原材料,除去杂质后,放入清水中进行振荡清洗3‑5min,捞出淋干后,置于菊花原材料重量50倍的95℃水中进行漂烫30min,之后,降温至75‑80℃浸泡40min,然后,过滤除渣,得到菊花提取液,备用;步骤四:晶状体细胞培养液的制备:按照体积比,取2‑3份步骤一得到的枸杞提取液和1‑2份步骤二得到的菊花提取液进行混合,之后,向混合液中加入干粉细胞培养基12.0g,至混合均匀,在室温环境下进行0.22μm过滤除菌,之后,转至于100ml的培养瓶中用于晶状体细胞的培养;步骤四:晶状体细胞的培养:用上述制备得到的培养基,添加胎牛血清、谷氨酰胺、丙酮酸钠和青链霉素合剂等,并调整PH值为7.2‑7.4,预热备用,解冻晶状体细胞于60cm培养皿预热的培养基中,在饱和湿度、37℃的CO<sub>2</sub>培养箱中培养过夜至贴壁,次日,换液继续培养,等待细胞观察及检测。 |
地址 |
750004 宁夏回族自治区银川市兴庆区胜利南街1160号宁夏医科大学 |