CRISPR/Cas9靶向敲除兔BMP2基因的细胞模型及其应用

摘要

本发明属于分子生物学与生物医学技术领域，具体的说，本发明涉及基于CRISPR/Cas9靶向敲除兔骨形态发生蛋白2(BMP2)基因的细胞模型及其应用。本发明根据CRISPR/Cas9的设计原则，在兔BMP2基因上3个靶向位点，合成相应的oligos，并且将其构建在px458载体上。在兔骨髓间充质干细胞中利用针对这3个靶点构建出的CRISPR/Cas9系统，可以有效的敲除兔BMP2基因，这一系统易于操作，兔BMP2基因敲除效率高。本发明公开的兔BMP2基因敲除细胞模型能极大地促进BMP2基因功能及信号通路的相关研究。

主权项

CRISPR‑Cas9靶向敲除兔BMP2基因的细胞模型，所述CRISPR‑Cas9用于特异性靶向人TCAB1基因的gRNA在兔BMP2基因上的靶序列符合5’‑N(20)‑NGG3’或者5’‑CCN‑N(20)‑3’的序列排列规则，兔BMP2基因上的靶序列是唯一的，其特征在于：所述gRNA在兔BMP2基因的靶向位点位于兔BMP2基因的外显子上。