发明名称 一种分析VDR基因多态性位点Cdx-2的方法及应用
摘要 本发明适用于生物技术领域,提供了一种分析VDR基因多态性位点Cdx-2的方法及应用,该方法包括以下步骤:设计用于扩增VDR基因Cdx-2多态性位点片段的PCR引物,并通过突变PCR引物近3’端的一个碱基形成特异性PCR引物,所述特异性PCR引物的突变碱基与Cdx-2多态性位点的G等位基因碱基形成能被BseMII内切酶识别的酶切位点;使用上述特异性PCR引物扩增Cdx-2多态性位点的DNA片段得到PCR扩增产物;使用BseMII内切酶对上述扩增产物进行酶切反应得到酶切产物;对所述酶切产物进行电泳、并分析电泳结果。本发明提供的新的分析VDR基因多态性位点Cdx-2的方法,操作简单、且准确性高。
申请公布号 CN103952486B 申请公布日期 2016.06.22
申请号 CN201410168692.0 申请日期 2014.04.23
申请人 深圳市慢性病防治中心 发明人 周继昌;朱玉梅;刘小立;杨应周;杨慧;郭平;徐健;车晓玲
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 深圳中一专利商标事务所 44237 代理人 张全文
主权项 一种非疾病治疗和诊断目的的分析VDR基因多态性位点Cdx‑2的方法,包括以下步骤:设计用于扩增VDR基因Cdx‑2多态性位点片段的PCR引物,并通过突变PCR引物近3’端的一个碱基形成特异性PCR引物,所述特异性PCR引物的突变碱基与Cdx‑2多态性位点的G等位基因碱基形成能被BseMII内切酶识别的酶切位点;使用上述特异性PCR引物扩增Cdx‑2多态性位点的DNA片段得到PCR扩增产物;使用BseMII内切酶对上述扩增产物进行酶切反应得到酶切产物;对所述酶切产物进行电泳、并分析电泳结果,其中,所述特异性PCR引物的上游引物用Cdx‑2F表示,下游引物用Cdx‑2B表示,所述Cdx‑2F、Cdx‑2B的序列分别如SED ID NO:1、SED ID NO:2所示,具体为:Cdx‑2F:TTATATATATTCCTGAGTAAACTAGGTCTCA;Cdx‑2B:GCGTGGAGTTAGAAAGACAGAAG,其中Cdx‑2F近3’端第三个碱基T为突变碱基。
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