一种建立农杆菌介导豆瓣绿高效转染体系的方法

摘要

本发明公开了一种建立农杆菌介导豆瓣绿高效转染体系的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：侵染和共培养阶段：将豆瓣绿无菌苗叶片块放入三角瓶中，倒入农杆菌菌液进行侵染，瓶口密封抽真空，侵染后倒去菌液，将叶片晾干，转接到共培养培养基中暗培养得到愈伤组织；筛选阶段：将愈伤组织转接到筛选培养基中筛选得到幼芽；生根阶段：将获得的幼芽转接到生根培养基培养，得到抗性苗；阳性检测阶段：取抗性苗的叶片，进行阳性检测，建立农杆菌介导豆瓣绿高效转染体系。本发明提供的农杆菌介导豆瓣绿的转化体系，愈伤组织形成频率、分化频率以及转化率都较高，可以满足观音莲育种需求，适合大规模工业生产和商业育种。

主权项

一种建立农杆菌介导豆瓣绿高效转染体系的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：侵染和共培养阶段：将豆瓣绿无菌苗叶片块放入三角瓶中，倒入农杆菌菌液进行侵染，瓶口密封抽真空，侵染后倒去菌液，将叶片晾干，转接到共培养培养基中暗培养；筛选阶段：将共培养后的叶片转接到筛选培养基中筛选得到幼芽；生根阶段：将获得的幼芽转接到生根培养基培养，得到抗性苗；阳性检测阶段：取抗性苗的叶片，提取DNA，进行PCR扩增，将PCR产物进行凝胶电泳，得到农杆菌成功侵染豆瓣绿的阳性苗，建立农杆菌介导豆瓣绿高效转染体系。