测定12－去羟基阿奇霉素及其制剂的含量的抗生素微生物检定法

摘要

本发明公开了一种测定12－去羟基阿奇霉素及其制剂的含量的抗生素微生物检定法，该测定方法通过选取检定菌、培养液、培养基并配制灭菌缓冲液、制备标准品溶液、制备供试品溶液及测定步骤来完成，具有测定准确率高、方便等优点。

主权项

1、测定12-去羟基阿奇霉素及其制剂的含量的抗生素微生物检定法，12-去羟基阿奇霉素的化学结构为：其特征在于该测定方法步骤如下：第一步：选取检定菌、培养液、培养基并配制灭菌缓冲液：检定菌为短小芽孢杆菌[CMCC]63202，菌液浓度为0.3％～0.7％；培养基为I号pH7.8～8.0的抗生素检定用培养基，灭菌缓冲液为pH7.8～8.0的磷酸盐缓冲液，其配制方法为：取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使成1000ml，滤过，在115℃灭菌30分钟，备用；第二步：制备标准品溶液：精密称取阿奇霉素标准品10mg，置500ml容量瓶中，用5ml乙醇溶解后，加灭菌缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为标准品高剂量溶液；精密量取标准品高剂量溶液25ml，置50ml容量瓶中，用灭菌缓冲液稀释至刻度，作为低剂量溶液；第三步：制备供试品溶液：精密称取12-去羟基阿奇红霉素10mg，分别置500ml容量瓶中，按1ml∶2mg加乙醇溶解后，加灭菌缓冲液至刻度，摇匀，作为供试品的高剂量溶液；精密量取供试品的高剂量溶液25ml，置50ml容量瓶中，加灭菌缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为供试品的低剂量溶液；第四步：测定：取每一个供试液平底双碟8块，分别注入加热融化的培养基20ml，使在碟底内均匀摊布，放置水平台上使凝固，作为底层；另取培养基适量加热融化后，放冷至60℃，加入短小菌悬液1.2ml，摇匀，在每一双碟中分别加入5ml，使在底层上均匀摊布，作为菌层，放置水平台上冷却后，在每一双碟中以等距离均匀安置不透钢小管4个，用陶瓦盖覆盖备用；在每一双碟中对角的2个不锈钢小管中，分别滴装高浓度及低浓度的标准品溶液，其余2个小管中分别滴装相应的高低两种浓度的供试品溶液，37℃培养15～18小时后，取出，在抑菌圈电脑测量分析仪上测量并计算结果即可。