富硒联合固氮菌及其冷冻干粉、液体和固体肥料的制法

摘要

本发明提出了富硒联合固氮菌剂及其冷冻干粉、液体肥料和固体肥料的制法，富硒联合固氮菌液的培养基是由Na₂SeO₃、蛋白胨、酵母膏、稀土水溶液、NaCl、水等组成，经过茄子瓶分别接入三种菌株：固氮粪产碱杆菌其代号为A15，固氮巨大芽胞杆菌其代号为N13，固氮阴沟肠杆菌其代号为E26。摇瓶扩大培养、种子罐培养发酵罐液体发酵、防腐处理调整pH值，而制得，即为液体菌肥；发酵罐发酵后，经过真空冷冻干燥的技术常规操作即得冷冻干粉。其固体肥料的培养基包括草炭、鸡粪、石膏、稀土、KH₂PO₄、Na₂SeO₃·5H₂O，接入发酵罐发酵的菌种，经过堆料发酵、即得成品。本发明工艺合理成熟、适于工业化生产。

主权项

1.一种富硒联合固氮菌的制法，其特征在于：(一)、其培养基的组分重量比为： Na2SeO3·5H2O 0.8-1.0％ 蛋白胨 0.9-1.1％ 酵母膏 0.4-0.6％ NaCl 0.4-0.6％ 色氨酸 50μg/ml 20％浓度的稀土水溶液 1-2％ 水 其余用水培养基配制好后装入茄子瓶按50μg/ml加入色氨酸，经灭菌后按5％-10％接种，在30℃-34℃200rmp/分下，摇瓶发酵24-48小时；(二)、种子罐按其容积的60％注入培养基灭菌后，温度降入50℃以下时，按35μg/ml注入色氨酸，温度低于35℃后按5-10％接种；(三)、011号罐A15单独发酵，012号罐N13.E26混合发酵，其发酵条件为温度30-35℃，压力0.05MPa，空气流量1∶0.2-0.3，转速200rmp时间8-10h，其后压入大罐，两罐压出比为2∶1，取样为OD000＞1，PH＞7.5，镜检菌体形态；(四)、大罐灭菌后，温度低于50℃，注入色氨酸，按25μg/ml，温度低于35℃时，接种1-3％，在温度30℃-35℃、压力0.05Mpa、空气流量1∶0.2-0.3、转速200rmp下，发酵6-8h，取样OD＞0.9、PH＞7，IAA值：0.37，镜检活菌数大于108个/ml；(五)、加防腐剂、保护剂，调整PH至7-7.5，符合相关标准要求，(六)、封装产品，得富硒联合固氮菌剂亦即其液体肥料。