发明名称 |
一种ɑ-角蛋白底物特异性提高的角蛋白酶及其构建方法和应用 |
摘要 |
本发明公开了一种ɑ‑角蛋白(羊毛鳞片)的底物特异性提高的角蛋白酶及其应用,属于遗传工程领域。本发明采用定点突变技术将地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis BBE11‑1的角蛋白酶(ker)基因进行定点突变并克隆连接到枯草芽孢杆菌表达载体pMA5,转化Bacillus subtilis WB600,经纯化验证得到一株可以产具有较好ɑ‑角蛋白底物特异性的角蛋白酶的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600‑pMA5‑kerMA,该菌株表达的角蛋白酶在对天青角蛋白(ɑ‑角蛋白)的比酶活较野生型增加了50%。同时突变体较野生型角蛋白酶具有更好的羊毛织物防毡缩效果,这为角蛋白酶的应用奠定了良好的基础。 |
申请公布号 |
CN104232610B |
申请公布日期 |
2016.11.16 |
申请号 |
CN201410467083.5 |
申请日期 |
2014.09.12 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
陈坚;刘柏宏;张娟;堵国成;方真 |
分类号 |
C12N9/56(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/75(2006.01)I;C12R1/125(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/56(2006.01)I |
代理机构 |
北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 |
代理人 |
张勇 |
主权项 |
一种对ɑ‑角蛋白底物特异性提高的角蛋白酶,其特征在于,角蛋白酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |