从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法

摘要

本发明提供一种从破壁领子孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法，包括制备过氧麦角甾醇粗提物、中压制备色谱纯化、模拟移动床纯化和重结晶步骤。本发明工艺简单稳定、适合工业化连续生产、产品收率较高、生产成本低。

主权项

从破壁灵芝孢子粉中提取过氧麦角甾醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备过氧麦角甾醇粗提物：采用渗漉法或回流提取法对破壁灵芝孢子粉进行提取，所得提取液减压浓缩蒸至干，得到过氧麦角甾醇粗提物A；(2)中压制备色谱纯化：将步骤(1)制得的过氧麦角甾醇粗提物A用60‑95％甲醇水溶液溶解，制得中压制备色谱上样液，进行中压制备色谱纯化，收集含过氧麦角甾醇的流份，减压浓缩至干，得到过氧麦角甾醇浸膏B；(3)模拟移动床纯化：将步骤(2)得到的过氧麦角甾醇浸膏B用60‑95％甲醇水溶液溶解，制得进样液，注入模拟移动床色谱分离系统进一步纯化，过氧麦角甾醇在萃取液中，将萃取液减压浓缩至干，得到富含过氧麦角甾醇的干膏C；(4)将步骤(3)中富含过氧麦角甾醇的干膏C用乙酸乙酯‑环己烷混合溶液加热溶解，转入0‑8℃环境中重结晶，过滤并洗涤沉淀得到高纯度过氧麦角甾醇，其中，所述步骤(1)中，渗漉法或回流提取法所用的提取溶剂为乙酸乙酯、环己烷、石油醚中的一种或其任意比例混合物，所述渗漉法的浸渍时间为24‑48h，浸渍温度为室温，近似等速收集5‑10BV的渗滤液，所述回流提取法的液固比为6‑10，微沸状态下提取1‑2h，过滤，重复提取1‑2次后合并滤液；所述步骤(2)中，中压制备色谱柱采用30‑50μm ODS硅胶自填，柱高45cm，上样液的固含量为0.05‑0.2g/mL，上样流速为2‑5mL/min，上样体积为0.1BV，采用60‑95％甲醇水溶液以1.2‑2.0BV/h的速度等度洗脱；所述步骤(3)中，进样液的固含量为0.05‑0.2g/mL，模拟移动床色谱分离系统中色谱柱填料为30‑50μm粒度的ODS反向硅胶，系统采用8‑16支色谱柱串联组成，分成四区，每区有2‑4支相同的色谱柱串联，系统参数设置为室温，进样泵流速为3‑6mL/min，洗脱泵流速为16‑38mL/min，萃取液流速为10‑23mL/min，萃余液流速为9‑21mL/min，切换时间为10‑24min；所述步骤(4)中，乙酸乙酯‑环己烷混合溶液的用量为干膏C的10‑20倍，乙酸乙酯与环己烷的体积比为50:50‑10:90，重结晶的时间为36‑48h。