INHIBIN ISOLATED FROM OVARIAN FOLLICULAR FLUID

摘要

Une protéine satisfaisant tous les critères biologiques caractéristiques de l'inhibine a été isolée d'une source gonadale. La présente invention décrit la purification et la caractérisation de l'inhibine et l'utilisation du matériau purifié pour élever des anticorps, l'utilisation de l'inhibine et desdits antisérums dans une analyse radio-immunologique quantitative, ainsi que les applications in vitro et in vivo de l'inhibine et de l'anticorps de l'inhibine. La présente invention prévoit une inhibine, protéine purifiée, caractérisée par le fait que a) son poids moléculaire apparent déterminé par SDS-PAGE est de 56.000 9E 1.000; b) son point isoélectrique est situé entre 6,9 et 7,3; c) cette protéine peut se lier spécifiquement au concanavaline-A-sépharose; d) cette protéine est formée de deux sous-unités, caractérisées par le fait que i) leurs poids moléculaires apparents déterminés par SDS-PAGE sont de 44.000 9E 3.000 et de 14.000 9E 2.000 respectivement; ii) le point isoélectrique de la sous-unité de poids moléculaire 44.000 se situe entre 6,0 et 7,0; iii) les séquences d'acide aminé N-terminales des deux sous-unités sont décrites dans la présente invention; e) cette protéine peut supprimer l'hormone de stimulation des follicules mais pas l'hormone de lutéinisation, l'hormone de stimulation de la thyroïde ou la prolactine dans un système d'analyse biologique in vitro; f) cette protéine peut être marquée avec de l'iode radioactif. Est également prévu un procédé d'isolation et de purification de l'inhibine provenant du fluide folliculaire ovarien mammifère, caractérisé par a) une ou plusieurs étapes de chromatographie à pénétration de gel, b) une ou plusieurs étapes de chromatographie liquide à phase inversée de rendement élevé, c) une ou plusieurs étapes d'électrophorèse à gel de polyacrylamide de préparation, d) l'élution électrophorétique de l'inhibine purifiée.