发明名称 一种新化合物球腔烯胺的制备方法
摘要 本发明提供一种新化合物球腔烯胺的制备方法,包括以下步骤:1)获得ZJLQ129发酵液;2)获得球腔菌素;3)获得球腔烯胺。
申请公布号 CN106011193A 申请公布日期 2016.10.12
申请号 CN201610348903.8 申请日期 2016.05.23
申请人 浙江大学 发明人 章初龙;林福呈;冯晓晓;王丽薇;王国平
分类号 C12P17/04(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N 主分类号 C12P17/04(2006.01)I
代理机构 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 代理人 黎双华
主权项 一种新化合物球腔烯胺的制备方法,其特征是:包括以下步骤:1)制备ZJLQ129发酵液:将直径为0.5厘米的ZJLQ129菌饼共10个接入500ml PDB中于25℃,200转摇床上培养10天得到菌丝液,菌丝液在无菌条件下粉碎;在500ml PDB接入菌丝液25ml,室温下静置培养2周后过滤分别获得发酵液与菌丝体。2)制备球腔菌素:发酵液用乙酸乙酯萃3次后萃取液浓缩得浸膏A,重1.72g,菌丝体用丙酮浸泡过夜后浓缩至小体积,获得浸膏B,重1.76g;合并二部分得浸膏C,重3.5g;取浸膏C 3.5g加15g硅胶拌样,旋转蒸发仪蒸干,200‑300硅胶950克干法装柱,将拌样后的样品上样后进行柱层析分离,依次用石油醚:乙酸乙酯体积比4:1,石油醚:乙酸乙酯体积比3:2,石油醚:乙酸乙酯体积比3:7,乙酸乙酯:甲醇体积比4:1分别进行梯度洗脱分离,硅胶薄层层析和茴香醛显色剂显色,合并Rf值为0.46且茴香醛显色为蓝色的组分;该组分1.70g用凝胶柱层析分离纯化,以氯仿:甲醇体积比1:1为洗脱剂洗脱分离,硅胶薄层层析和茴香醛显色剂显色,获得球腔菌素纯品300mg。3)制备球腔烯胺:取纯品球腔菌素200mg,于三颈瓶中,冰盐浴中至0℃,通入氨气反应30分钟,样品浓缩至干,取浓缩后的样品7克用甲醇溶解,加14g硅胶拌样上柱,加入洗脱剂为石油醚:氯仿:甲醇=18:4:1,200‑300目硅胶柱层析分离,获得新化合物球腔烯胺150mg。
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