| 主权项 |
1.一种编码杀虫性蛋白质之合成基因,其中该基因之硷基序列经修饰以使密码子用法符合禾本植物基因之密码子用法,该硷基序列列示如下:2.如申请专利范围第1项之基因,其中该基因经合成以使密码子用法符合禾本植物基因之密码子用法,差异在约4之内。3.如申请专利范围第1项之基因,其中该基因经合成以使密码子用法符合编码禾本植物各别胺基酸之基因的密码子用法,差异在40之内。4.如申请专利范围第1项之基因,其中该基因经合成以致使于自然生成之杀虫性蛋白质中占优势的10胺基酸之密码子用法,符合密码子XXC及XXG之混合密码子用法,其中该二个X各自独立选自A、G、C或T,符合组成禾本植物蛋白质之个别胺基酸,差异为25。5.一种产制重组体禾本植物之方法,此方法包括将载体及衍生自禾本植物之原生质体悬浮于液体培养基中,该载体含有在禾本植物中具功能之启动子,如申请专利范围第1项之结构基因及于该启动子下游之终结子,施加电脉冲以将载体转形至原生质体中,于含有稻植株培养细胞之培养基中培育以形成集落,再自该集落中再生植物。图1:图示说明以PCR(聚合链反应)合成双股DNA。图2:图示说明以PCR自寡核酸中合成双股DNA。图3:图示说明PCR自寡核酸中合成双股DNA。图4:用于PCR中引子之硷基序列(片段1)。图5:用于PCR中引子之硷基序列(片段5)。图6:用于PCR中引子之硷基序列(片段4)。图7:用于PCR中引子之硷基序列(片段2)。图8:用于PCR中引子之硷基序列(片段6)。图9:用于PCR中引子之硷基序列(片段3)。图10:于构筑质体pMCSC8、pMCSA8.及pMCSK8时用于置换之选殖位置。图11:图示说明质体pBT1291之构筑。图12:于转形细胞筛选中,当PCR产物接受电泳时所得之移动型式。图13:当用于转形之基因以南方杂交法侦测时,所得之移动型式。图14:当用于转形之基因,其mRNA以北方杂交法侦测时所得之移动型式。图15:当经表现之B.t.毒素蛋白质于导入外来基因之稻叶中以西方墨点法侦测时所得之移动型式。图16:分离自稻中之基因密码子用法。图17:似乎可于稻叶中高度表现之基因密码子用法。图18:具有SEQ ID NO:1硷基序列之合成基因之密码子用法。图19:第二代转形细胞之PCR产物电泳所得之移动型式。图20:当经表现B.t.毒素蛋白质于第二代叶子中(RC_1C)以西方墨点法侦测时所得之移动型式。图21:于下列所观察之个别胺基酸中密码子用法之排列:稻基因;似乎可以稻叶中高度表现之基因;具有SEQ ID NO:1硷基序列之合成基因;及于B.t.毒素中编码个别胺基酸之天然基因。图22:于下列所观之个别胺基酸中密码子XXC/G用法之排列:稻基因;似乎可于稻叶中高度表现之基因;具有SEQ ID NO:1硷基序列之合成基因;及于B.t.毒素中编码个别胺基酸(甲硫胺酸及色 |
