一种基于微流控芯片的肺炎支原体和流感病毒特异抗体IgM的检测方法

摘要

本发明涉及一种基于微流控芯片的肺炎支原体和流感病毒的特异抗体IgM的检测方法和应用。该方法以具有多条管道的微流控芯片作为反应平台，利用化学发光信号进行检测，实现了对肺炎支原体和流感病毒血清特异抗体IgM的单独或同时检测。该检测方法将微流控芯片和化学发光相结合，兼具了微流控芯片的快速、高效和样品用量小，化学发光高特异性、操作简单、成本低、快速等优点，是一种同时多目标，实时，灵敏度高的检测方法，可应用于肺炎和流感的快速诊断。

主权项

一种基于微流控芯片的肺炎支原体和/或流感病毒的特异抗体IgM的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)检测芯片的制作：将芯片与固相反应基底贴合后形成封闭的微流管道，向所述微流管道中分别通入肺炎支原体和流感病毒的特异性重组蛋白抗原，所述特异性重组蛋白抗原包被在基底上；包被好后，抽出包被液，揭去所述芯片，并贴上另一芯片，使两块芯片上的管道相互垂直，交叉角度为90°，将其与基底密封后，向微流管道通入BSA封闭液，封闭后抽出封闭液；所述芯片带有7条并行微流管道；所述微流管道长度为3‑5cm，所述微流管道直径500‑600μm，高度500‑600μm，所述微流管道的间距为1‑3mm；(2)向步骤(1)所述检测芯片中的微流管道加样孔中加入20μL血清样品，孵育15min，用经过优化的含有0.05％吐温的洗涤液进行洗涤；(3)向步骤(2)所述微流管道中加入经过优化的HRP标记的羊抗人IgM抗体，用经过优化的含有0.05％吐温的洗涤液进行洗涤；(4)向步骤(3)所述微流管道中加入鲁米诺化学发光底物，通过化学发光检测仪进行检测。