一种霍利斯格里蒙特氏菌的快速检测方法

摘要

本发明公开了一种用于霍利斯格里蒙特氏菌的特异性引物，是根据副溶血性弧菌种特异性基因fur的保守区域所设计的一对外引物、一对内引物和一对环引物；本发明又公开了一种霍利斯格里蒙特氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：霍利斯格里蒙特氏菌DNA的提取；外围引物的验证；环介导等温扩增反应体系的建立；环介导等温扩增程序的建立；扩增产物荧光信号的检测。本发明的检测方法灵敏度高，最低检测至10² CFU/mL；特异性强，只检出霍利斯格里蒙特氏菌，对其他致病菌检测结果均为阴性；快速检测，比实时荧光定量PCR的检测速度快，明显提高检测效率；扩增产物通过实时荧光定量PCR仪检测，20~40min即可完成。

主权项

一种用于霍利斯格里蒙特氏菌的特异性引物，其特征在于：是根据副溶血性弧菌种特异性基因fur的保守区域所设计的一对外引物、一对内引物和一对环引物；所述的一对外引物为：如序列表SEQ ID NO:1所示的正向外引物GHF3：GGCAACTGTCTACCGTGTAC；如序列表SEQ ID NO:2所示的反向外引物GHB3：GCTGTGATTCGTCAGTCTGA；所述的一对内引物为：如序列表SEQ ID NO:3所示的正向内引物GHFIP：GTCGCCAGCTCAAACACAGATTTTTTTAACCAGTTTGATGATGCCGG；如序列表SEQ ID NO:4所示的反向内引物GHBIP：CACCACCATGACCACTTGGTTTGTTTTTATCTCTCTGGCGCTGCTC；所述的一对环引物为：如序列表SEQ ID NO:5所示的正向环引物GHLF：CCACCTTCAAAATGGTGACGGGT；如序列表SEQ ID NO:6所示的反向环引物GHLB：GTCGAGTCATCGAGTTTACGGACG。