一种星油藤的组织培养快繁方法

摘要

本发明公开了一种星油藤的组织培养快繁方法，星油藤（Plukenetia volubilis L.）又名南美油藤、印加果、印加花生等，是大戟科一种多年生木质藤本油料植物，原产于南美洲安第斯山脉地区热带雨林。从星油藤种子中榨取的植物油被认为是世界上最好的植物油，可用于食品、保健、制药、化妆品等方面。目前，星油藤种苗主要通过种子和扦插方式繁育，存在周期长、成本高、效率低下等问题。因此，本发明以星油藤带节茎段为外植体，通过不定芽诱导、增殖、生根、炼苗移栽等过程成功获得了星油藤离体再植株，建立星油藤组织培养快速繁殖技术体系，对于进行星油藤优良品种的快速繁殖和大面积推广、促进星油藤的产业化发展具有重要意义。

主权项

一种星油藤的组织培养快繁方法，其特征在于包括以下工艺步骤：（1）诱导不定芽：选取星油藤当年生带节藤茎为外植体,经75%酒精消毒5～20秒种后，用无菌水冲洗2～5次后置于0.1%的升汞溶液中消毒10～30分钟，然后用无菌水冲洗3～6次，经无菌滤纸吸干水分后剪切成2～4cm的带节藤茎，并接种到诱导培养基上,于25～28℃条件下全暗培养，直至诱导形成不定芽，所述的诱导培养基为：MS+0.1～0.5mg/LTDZ+1.0～2.0mg/L 6‑BA+0.1～0.5mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8；（2）继代培养：将步骤（1）获得的不定芽从基部切下，接种到增殖培养基上进行继代培养，接种后置于每天光照12～15小时，光照强度为1500～2000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养，20～30天转接一次。所述的增殖培养基为：MS+1.0～2.0mg/L 6‑BA+0.1～0.5mg/L NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8；（3）生根培养：将步骤（2）继代培养长至2～4cm的不定芽分切并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后先在25～28℃条件下全暗培养3～5天，然后置于每天光照12～15小时，光照强度为2000～3000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根，所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～0.5mg/L IBA+1.0～2.0mg/L GGR+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L，琼脂，pH为5.4～5.8；（4）炼苗移栽：将长至6～8cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由比例8：1：1的泥炭土、农家肥、河沙混合成的基质中并定植于大田中。