一种基于蛋白质和多糖构筑生物体保护层的制备方法

摘要

一种基于蛋白质和多糖构筑生物体保护层的制备方法。本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于蛋白质和多糖构筑生物体保护层的制备方法。本发明的目的是提供一种在外界营养物质匮乏的条件下可以自营养供给生物体使之可以进行生长与繁殖，同时无需外界苛刻的降解条件，便可以自降解使生物体进行生长与繁殖。方法：一、制备氨基化BSA；二、制备羧基化葡聚糖；三、包覆。本发明在微生物体表面构筑一层双组分结构的保护层，其中蛋白质和葡聚糖提升了保护层生物相容性和营养供给维持生物体活性以及该整体保护层的可降解性，同时也提高了生物体在外界不利条件下的防御保护作用。

主权项

一种基于蛋白质和多糖构筑生物体保护层的制备方法，其特征在于基于蛋白质和多糖构筑生物体保护层的制备方法具体是按以下步骤进行的：一、制备氨基化BSA：将己二胺溶于水中配置成己二胺溶液，采用稀盐酸将己二胺溶液的pH调节为6.0～8.5，将调节pH后的己二胺溶液以0.5～3mL/min的速率滴加到牛血清白蛋白中，得到反应液，再向反应液中加入1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐，在室温下反应5h～12h后，透析、冷冻干燥，得到氨基化BSA；所述己二胺的质量与水的体积比为1g:(10～250)mL；所述己二胺与牛血清白蛋白的质量比为1:(0.025～1.5)；所述己二胺与1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐的质量比为1:(0.01～0.075)；二、制备羧基化葡聚糖：采用二甲基亚砜Ⅰ溶解葡聚糖，得到葡聚糖溶液；采用二甲基亚砜Ⅱ溶解酸酐，得到酸酐溶液；然后以0.1～2mL/min的速率向葡聚糖溶液中滴加酸酐溶液，再向葡聚糖溶液中加入4‑二甲氨基吡啶，在温度为50℃～90℃的条件下反应4h～18h，透析、冷冻干燥，得到羧基化葡聚糖；所述葡聚糖的质量与二甲基亚砜Ⅰ的体积比为1g:(10～250)mL；所述酸酐的质量与二甲基亚砜Ⅱ的体积比为1g:(10～250)mL；所述葡聚糖与4‑二甲氨基吡啶的质量比为1:(2.5～100)；三、包覆：将生物体配制成生物体水溶液，将氨基化BSA和羧基化葡聚糖加入到生物体水溶液中，震荡10s～90s后静置10min～60min，得到氨基化BSA和羧酸化葡聚糖包覆的生物体；所述生物体水溶液的浓度为0.1mg/mL～2mg/mL；所述氨基化BSA与生物体水溶液的体积比为1:(5～250)；所述羧基化葡聚糖与生物体水溶液的体积比为1:(5～250)。