固体支持物上的样品制备

摘要

提供了用于使用固定的转座酶和转座子末端在表面上产生5'‑加标签的双链靶DNA的固定的文库的方法和组合物。所述方法可用于产生在包括大量平行DNA测序的多种方法中使用的5'‑和3'‑加标签的DNA片段。

主权项

一种制备加标签的DNA片段的固定的文库的方法，所述方法包括：(a)提供具有转座体复合物固定于其上的固体支持物，其中所述转座体复合物包含结合至第一多核苷酸的转座酶，所述第一多核苷酸包含(i)3’部分，所述3’部分包含转座子末端序列，以及(ii)第一标签，所述第一标签包含第一标签域；(b)在靶DNA藉以被所述转座体复合物片段化，并且所述第一多核苷酸的3'转座子末端序列藉以转移至所述片段的至少一条链的5'末端的条件下，将所述靶DNA施加于所述固体支持物；从而产生双链片段的固定的文库，其中至少一条链是用所述第一标签在5'‑加标签的。