一种可诱导调控的标记蛋白表达框及其构建的重组载体与应用

摘要

本发明涉及到一种可诱导调控的标记蛋白表达框及其构建的重组载体与应用。利用筛选标记蛋白和可诱导调控元件构建可诱导调控的筛选标记蛋白表达框，然后通过可诱导调控的筛选标记蛋白表达框制备得到以大肠杆菌毒性蛋白为筛选标记的重组载体，利用该重组载体控制大肠杆菌毒性蛋白在二次同源重组时表达，杀死或抑制只发生一次同源重组菌株的生长，而发生二次同源重组菌株生长不受限制，从而提高二次同源重组菌株的筛选效率，其简化了芽孢杆菌同源重组法敲入或敲出基因的操作流程，减少了操作难度，降低了劳动强度能够很好地应用于芽孢杆菌基因敲出与外源基因导入芽孢杆菌中。

主权项

一种可诱导调控的标记蛋白表达框，其特征在于，包括筛选标记蛋白和可诱导调控元件；其中筛选标记蛋白为大肠杆菌毒性蛋白包括ccdB、mazF、密码子优化后的ccdB或密码子优化后的mazF中的任意一种；可诱导调控元件包括IPTG诱导的内含乳糖操作子的grac启动子、木糖诱导的木糖xylA启动子、密码子优化后的IPTG诱导的内含乳糖操作子的grac启动子或密码子优化后的木糖诱导的木糖xylA启动子中的任意一种。