同时测定熊果酸与五味子甲乙丙素单体成分浓度的方法

摘要

本发明公开了一种同时测定熊果酸与五味子甲乙丙素单体成分浓度的方法，属于用色谱法分析材料。本发明分别制备山茱萸和五味子混合样品以及待测样品阴性对照溶液，经预处理后，在流动相为乙腈:0.1%磷酸水溶液=67:33，体积流量0.8‑1.2 mL/min；紫外检测波长190‑220 nm；柱温25‑40℃时条件下，进行工作曲线的制备和四种单体成分的色谱分离及含量的测定。实现了在相对短时间内，同一波长色谱实验条件下，同时检测并完全分离熊果酸及五味子甲、乙、丙素四种单体成分的浓度，基线平稳，峰型对称美观，简便快速，分离度高，灵敏度高，重复性好，数据准确可靠，回收率高，提供了一种良好的质控检测手段。

主权项

一种同时测定熊果酸与五味子甲乙丙素单体成分浓度的方法，其特征在于：包括以下步骤：a．样品的预处理五味子、含熊果酸药材山茱萸干燥至恒重，粉碎后过40目筛，按重量份数比分别称取含熊果酸药材山茱萸10份，五味子1份，混合后加入10倍量无水乙醇；超声波提取并抽滤，滤液过0.22μm微孔滤膜，进样量10μl；待测样品缺含熊果酸药材山茱萸阴性对照溶液的制备：精称1份五味子粉末，制备、过滤、进样量同上；待测样品缺五味子阴性对照溶液的制备：精称10份含熊果酸药材山茱萸粉末，制备、过滤、进样量同上；b．高效液相色谱操作条件Agilent1260型高效液相色谱仪；色谱柱：150×4.6mm，5μm，ZORBAX SB‑C18；流动相为乙腈:0.1%磷酸水溶液=67:33，体积流量为0.8‑1.2mL/min；紫外检测波长为210nm；柱温25‑40℃；超声波提取的条件为250W，40KHz，20℃，超声时间为30min；c.工作曲线的制备分别精密称取熊果酸对照品1.36mg、五味子甲素对照品1.0mg、五味子乙素对照品1.36mg、五味子丙素对照品0.82mg，配成1mL的无水乙醇混合对照品溶液，并进行倍比稀释，共得到四种单体混合对照品稀释溶液的8个质量浓度，取后7个质量浓度进样测定的峰面积与对应浓度绘制标准曲线；各质量浓度液体分别过0.22μm微孔滤膜，进样10μL进行色谱分析，以峰面积A对浓度C进行线性回归，同时得到四种单体成分工作曲线；其中熊果酸最低检测质量浓度为0.025mg/L，五味子甲素的最低检测质量浓度为0.016mg/L，五味子乙素的最低检测质量浓度为0.019mg/L，五味子丙素的最低检测质量浓度为0.020mg/L；d.四种单体成分的色谱分离及含量的测定将经过预处理的五味子和含熊果酸药材山茱萸样品进行上机测定，四种单体成分进行色谱分离，并根据待测样品中每个中药单体成分对应的峰面积由相应的工作曲线分别计算出四种单体成分的含量。