一种超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪同时检测白酒中6种甜味剂的方法

摘要

本发明公开了一种超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪同时检测白酒中6种甜味剂(安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、纽甜)的方法，是将酒样氮吹除醇，经超高效液相色谱仪分离后，采用三重四级杆串联质谱仪进行多反应离子监测模式检测。本发明6种甜味剂在50～1000ng/mL范围内线性关系好，相关系数r²均大于0.993，样品的平均回收率在90～120％，检出限在2.69～5.16ng/mL，本发明方法准确可靠、简单快捷，可用于同时检测白酒中6种甜味剂。

主权项

一种超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪同时检测白酒中6种甜味剂的方法，其特征在于：所述6种甜味剂为安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖和纽甜；所用仪器为超高效液相色谱‑三重四极杆串联质谱仪UPLC‑MS/MS，包括超高效液相色谱仪UPLC和三重四极杆串联质谱仪MS/MS；所述方法是按如下步骤进行：(1)待测白酒的前处理移取5mL待测白酒于比色管中，用氮吹仪进行处理，去除待测白酒中的醇类物质，直至待测白酒剩余1～2mL，用超纯水定容至5mL，经0.22μm水系滤膜过滤后获得待测样品；(2)所用仪器的条件设定设定所述超高效液相色谱仪UPLC的条件为：色谱柱为BEH C18色谱柱；色谱柱温为30～40℃；流动相：A相为甲醇；B相为0.5～2mM乙酸铵水溶液，在所述乙酸铵水溶液中含体积浓度为0.1％～0.3％的乙酸；流速为0.2～0.3mL/min；洗脱方式为梯度洗脱：初始至4min时流动相A体积占0，流动相B的体积占100％；4min～6min时流动相A的体积为40％，流动相B的体积为60％；6min～8min时流动相A的体积为90％，流动相B的体积为10％；8min～8.1min时流动相A的体积为80％，流动相B的体积为20％；8.1min以后流动相A的体积为0，流动相B的体积为100％；进样量为2μL；检测所用时间为10min；设定所述三重四极杆串联质谱仪MS/MS的条件为：离子化模式为电喷雾离子源；扫描方式为负离子模式；脱溶剂气温度为400～500℃；锥孔气流量为40～50L/H；脱溶剂气流量为500～1000L/H；毛细管电压为1.0～3.0kV；锥孔电压为3～5V；(3)各甜味剂保留时间和监测离子的确定分别取安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖和纽甜配制浓度为300ng/mL的单标工作溶液，将各单标工作溶液通过三重四极杆串联质谱仪进行母离子的扫描，确定各甜味剂的监测离子和定量离子对，然后将各单标工作溶液进行UPLC‑MS/MS检测，确定各甜味剂的保留时间；其中：安赛蜜的监测离子为质荷比m/z＝161.84，保留时间为1.32min，定量离子对为161.84>81.879；糖精钠的监测离子为质荷比m/z＝181.90，保留时间为2.15min，定量离子对为181.90>105.83；甜蜜素的监测离子为质荷比m/z＝177.942，保留时间为2.66min，定量离子对为177.942>79.804；阿斯巴甜的监测离子为质荷比m/z＝293.03，保留时间为4.54min，定量离子对为293.03>216.99；三氯蔗糖的监测离子为质荷比m/z＝394.97，保留时间为4.02min，定量离子对为394.97>359.06；纽甜的监测离子为质荷比m/z＝377.17，保留时间为5.86min，定量离子对为377.17>345.143；(4)6种甜味剂标准曲线的绘制取安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖和纽甜配制质量浓度范围在50～1000ng/mL的混合系列标准工作溶液，然后按照(2)所设定的仪器的条件取混合系列标准工作溶液进样，分别进样2μL，作UPLC‑MS/MS检测，以各甜味剂的峰面积对其所相应的质量浓度进行线性回归，获得6种甜味剂的线性回归方程，各线性回归方程所对应的曲线，即为相应甜味剂的标准曲线；(5)待测样品的测试取待测样品进样，进样体积为2μL，作UPLC‑MS/MS检测，获得待测样品的质谱图和色谱图，根据保留时间和6种甜味剂的监测离子对待测样品进行定性分析，根据6种甜味剂的标准曲线对待测样品进行定量分析。