一种体外诱导扩增I型NKT细胞的方法

摘要

本发明涉及一种体外诱导扩增人I型NKT细胞的方法，采用“特异性刺激剂+分阶段细胞因子”的模式，由两个培养阶段构成，第一培养阶段以特异扩增I型NKT数量为主，使用特异性的刺激剂α‑GalCer对I型NKT细胞进行优势扩增，并以荷载α‑GalCer的CD1d表达细胞刺激I型NKT持续增殖，同时加入细胞因子IL‑2和IL‑7以辅助I型NKT生长；第二培养阶段同步进行I型NKT数量扩增与引导功能定向分化，以α‑GalCer孵育的CD1d表达细胞继续刺激I型NKT增殖，同时加入IL‑2、IL‑7与IL‑15，以辅助I型NKT细胞扩增并引导分化，培养结束前1‑2天在培养体系中，加入IL‑12以引导I型NKT细胞进一步定向分化，增强其杀伤活性。本发明所述方法操作简单，能在I型NKT细胞体外大量扩增的同时提高扩增产物的杀伤活性，适合规模化生产。

主权项

一种体外诱导扩增I型NKT细胞的方法，其特征在于该方法由两个培养阶段构成，第一培养阶段以特异扩增I型NKT数量为主，使用特异性的刺激剂α‑GalCer对I型NKT细胞进行优势扩增，并以荷载α‑GalCer的CD1d表达细胞刺激I型NKT持续增殖，并同时加入细胞因子以辅助I型NKT生长，所述细胞因子至少包括IL‑2和IL‑7中的一种；第二培养阶段同步进行I型NKT数量扩增与引导功能定向分化，以α‑GalCer孵育的CD1d表达细胞继续刺激I型NKT细胞增殖，同时加入IL‑2、IL‑7与IL‑15，以辅助I型NKT细胞扩增并引导分化，培养结束前1‑2天在培养体系中，加入IL‑12以引导I型NKT进一步定向分化。