多重PCR检测肠道新发原虫试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种多重PCR检测肠道新发原虫试剂盒，其用于同时检测隐孢子虫、贾第虫，环孢子虫和微孢子虫，该试剂盒包括如下引物：隐孢子虫的特异性引物：SEQ ID NO.1，SEQ ID NO.2；贾第虫的特异性引物：SEQ ID NO.3，SEQ ID NO.4；环孢子虫的特异性引物：SEQ ID NO.5，SEQ ID NO.6；微孢子虫的特异性引物：SEQ ID NO.7，SEQ ID NO.8。此外本发明还公开了一种隐孢子虫、贾第虫、环孢子虫和微孢子虫的多重PCR检测方法。通过各种验证表明本发明具有快速、敏感、特异性强的特点，解决了进行多次PCR检测的繁琐步骤，一次反应可以达到同时检测多个基因，明确病原体的作用，大大减轻了工作量，缩短了检测时间，降低了检测成本，具备更大的发展趋势。

主权项

一种多重PCR检测肠道新发原虫试剂盒，其特征在于，其用于同时检测隐孢子虫、贾第虫、环孢子虫和微孢子虫，该试剂盒包括如下引物：隐孢子虫的特异性引物：Cry‑F：5’‑TCAGCTTTAGACGGTAGGGTATTGG‑3’，SEQ ID NO.1；Cry‑R：5’‑CGAGCTTTTTAACTGCAACAACTTT‑3’，SEQ ID NO.2；贾第虫的特异性引物：Gia‑F：5’‑AGTGTTGAGATGCTTCAGGACATG‑3’，SEQ ID NO.3；Gia‑R：5’‑GCACGCTTAGCCTTCTTGGC‑3’，SEQ ID NO.4；环孢子虫的特异性引物：Cycl‑F：5’‑GACAGTTGGGGGCATTCGTATTTA‑3’，SEQ ID NO.5；Cycl‑R：5’‑CCCCCAGAACCCAGAGACTTTGAT‑3’，SEQ ID NO.6；微孢子虫的特异性引物：Micro‑F：5’‑ACGGAGGCGAAGGCGACACT‑3’，SEQ ID NO.7；Micro‑R：5’‑CTTGCGAGCGTACTATCCCCAGAG‑3’，SEQ ID NO.8。