一种检测鹅新城疫病毒的RT‑LAMP可视化试剂盒及其应用

摘要

本发明公开了一种快速检测鹅新城疫病毒的RT‑LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质；引物为如SEQ ID N0:1～4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT‑LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、10倍反应缓冲液、链置換DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgS0₄、FIP引物、BIP引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；接着将反应体系于61～65℃恒温反应50min,最后于80℃灭活4min；通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读：在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有鹅新城疫病毒；在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有鹅新城疫病毒。

主权项

一种检测鹅新城疫病毒的RT‑LAMP可视化试剂盒，其特征在于，包含引物组和显色物质；所述引物组如下所示：F3：5’‑GATGACAACATGTAGATGTGTA‑3’；B3：5’‑CCCAAGCTCAGTTGAGAT‑3’；FIP：5’‑CCGCCTAAGGATAAAACATTGCATGGGTATCATATCGCAAAACTATGG‑3’；BIP：5’‑ATAACTTTAAGGCTCAGTGGGGAATTGCCTGTTATTATTACTTGAGAA‑3’；所述显色物质为钙黄绿素和氯化锰。