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一种切花菊剑叶黄的组织培养方法，其特征在于：包括如下步骤：选择外植体：选择顶芽完全展开的生长健壮、无病虫害的切花菊剑叶黄幼嫩叶片或者茎段；消毒：用流线型自来水冲洗外植体2小时，放入烧杯中用无菌水浸泡2小时；然后在无菌超净工作台上将材料浸入75％酒精中消毒10秒，无菌水冲洗4次，然后转入0.1％升汞溶液中灭菌处理，叶片4min，茎段3min；之后用无菌水清洗5次，用无菌滤纸吸干水分，然后接种；培养：培养方式包括叶片组培和茎段组培；具体步骤如下：诱导芽体：诱导芽体阶段分两个时间段：第一段温度为25℃,光照60％，时长10h，第二段温度为24℃,光照0％，时长10h；继代增殖：将诱导芽体经继代培养后，接种于培养基中，培养基为MS+6‑BA 2mg/L+NAA 0.3mg/L；诱导生根：诱导生根阶段在光照培养箱中进行，培养分两个时间段：第一段温度为25℃，光照60％，时长14h，第二段温度为18℃，光照0％，时长10h；成苗：将有根的植株从培养瓶中取出，洗净根部黏附的琼脂，栽入珍珠岩基质中；移栽前期将空气湿度保持在75％～85％之间，遮光率为40％，环境温度控制在20℃～26℃，试管苗在20天左右移栽成活，并长出新根新叶；经1～2个月的管理，定植于富含腐殖质，经过灭菌处理的砂质壤土中；所述诱导生根的培养基为1/2MS+NAA 0.1mg/L+TDZ 0.15mg/L；所述叶片组培在诱导芽体之前先进行愈伤诱导：将外植体接种在MS+6‑BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L或MS+6‑BA 2mg/L+NAA 0.3mg/L培养基上，培养的温度为24‑25℃；愈伤诱导阶段第一周为暗期培养，从第二周起光照时间为10h/d；所述诱导芽体的培养基为MS+6‑BA 3mg/L+NAA 0.1mg/L或MS+6‑BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L。 |
